基因治疗用质粒DNA生产面临的问题及研究进展.pdfVIP

中国生物工程杂志 China Biotechnology ，20 11 ，31( 4) : 119-123 檪檪檪檪檪檪檪檪殏 檪 殏 檪 综 述 檪 檪 殏 殏檪檪檪檪檪檪檪檪 * 基因治疗用质粒 DNA 生产 面 临的 问题及研究进展 胡春生1 ，2 张庆林1 ＊＊ 张 通2 ( 1 军事 医学科学院放射与辐射医学研究所 北京 100850 2 内蒙古工业大学化工学院 呼和浩特 0 10051) 21 ， 摘要 基因 治疗 已成为 世纪一些重大疾病的有效治疗策略 目前携带治疗基因的 重组质粒 已 作为基因 药物进入 临床研究 。对用于基因 治疗的生物制品的生产与质量控制都有相 当严格的要 。 DNA ， ， 求 虽然 已建立大规模符合 药学规格的质粒 生产工艺 能满足临床需求 但在这些生产工艺 ， : 、 、 DNA 、 、 中还存在一些难 以克服 的瓶颈 如 载体构建 细胞裂解 细菌染色体 去除 细菌内毒素去除 生产过程 中质量控制等 。就近年来大规模 生产临床用质粒 DNA 遇到的相关问题及解决方案作一 综述 。 关键词 基因 治疗 质粒 DNA 大规模 碱裂 解 纯化 中图分类号 Q819 “ ” 90 ， DNA 大规模 一词在 年代末 一般表述为质粒 能对癌 基 因 具 有 激 活 或 对 抑 癌 基 因 具 有 失 活 的作 ［4］ 10 ～ 1000 mg ; 。 ， ， 生产量在 之间 然而近年来大规模生产质 用 另外 质粒载体生产工艺简便 易获得大量符合 DNA 100 g ， 药学规 格 的质 粒 DNA 。质 粒 DNA 是 双 链 共 价 闭环 粒 提及 的是生产能力能达到 甚至千克级规 ［1-2］ DNA ， 0 ． 8 ～ 120kb; DNA 模 。中试 生产 100 mg ～ 1 g 规模 的质粒 DNA 能满 分子 其大小范 围为 质粒 的形 ［5］ : 、 。 足临床前研究; 生产药用级质粒 DNA 需达到 1 g ～ 1 kg 式有 超螺旋 开环及线性形式 由于超螺旋质粒在 ， ，