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人参锈腐病菌拮抗菌的筛选及其耐药性测定.pdf
江苏农业科学2008年第3期
人参锈腐病菌拮抗菌的筛选及其耐药性测定
王慧,傅俊范,潘争艳
(沈阳农业大学植物保护学院,辽宁沈阳110161)
22—
摘要:以人参锈腐病菌为靶标菌,从79株木霉菌株中筛选出3株拮抗效果较好的菌株ECT一01、WWZ
研究发现,3株木霉菌主要通过重寄生作用寄生丁=人参锈腐菌菌丝上,吸取养分,最终使人参锈腐菌菌丝断裂死
亡。耐药性试验表明3株木霉菌对多菌灵极敏感,ECT一01对百菌清和恶霉灵的耐药性均高于其他2株木霉菌。
关键词:人参锈腐病;木霉菌;拮抗机理;筛选;耐药性
中图分类号:S435.675文献标志码:A 文章编号:1002—1302(2008】03—0111一03
人参锈腐病是由柱孢属真菌引起的¨j,是人参 农药二厂有限公司);95%恶霉灵原药(北京北农绿
生产上的主要病害之一,严重影响人参的品质及产 亨科技发展有限公司);75%百菌清可湿性粉剂[先
量。传统上对人参锈腐病的防治一般采用化学防 正达(中国)投资有限公司]。
治,但由于大量化学农药施用使得人参不仅产量低、 1.2拮抗木霉菌菌株的筛选
品质差,而且农药残留严重,直接影响其在国际市场 1.2.1拮抗木霉菌菌株的初筛将79株木霉菌菌
上的竞争力。在国家GAP的要求下,研制药效持久 株活化后打取菌片(直径为4mill),在PDA培养基
且对环境无压力的微生物农药已成为药用植物病害 上生长,3d后长势较快的菌株进行单孢分离口】,其
防治新的发展方向,药用植物病害生防菌的筛选也 余菌株予以淘汰。
就得到了广泛关注。木霉菌作为一种有效的生防 1.2.2 拈抗木霉菌菌株的复筛采用对峙培养
菌,广泛存在于土壤中,具有生存能力强、适应性广、 法[4。5J,用打孔器自培养5d的供试木霉菌和人参
能够拮抗多种病原真菌等优点,越来越受到人们重 锈腐菌菌落边缘打取直径4mm的菌块,分别接种
视【2J。本研究以人参锈腐病菌为靶标菌,从79株木 在平板上相对的两侧,相距4cm,倒置,25℃恒温培
霉菌株中筛选出具有高抑菌活性的3株菌株,并就 养,以只接种人参锈腐菌为对照。每处理重复3次,
其对3种常用杀菌剂的耐药性进行测定,最终筛选 每隔12h观察1次,5d后按以下公式计算抑制率:
出1株具有生防利用潜力的菌株ECT—01,为药用抑制率=(对照半径一处理半径)/(对照半径一菌
植物病害生防菌的进一步研究与利用奠定了基础。 碟半径)×100%。
1.3木霉菌与人参锈腐茵茵丝之阎的相互作用
1材料与方法
参考高克祥等∞1的方法,将木霉菌和人参锈腐
1.1供试材料 菌相对接种在加有一薄层灭菌PDA培养基的无菌
de—
供试靶标菌:人参锈腐菌(Cylindrocarpon载玻片上放人培养皿中,25℃恒温保湿培养,待木
sffuctan),由沈阳农业大学植物保护学院植物病害霉菌菌丝和人参锈腐菌菌丝接触后,取出载玻片,在
流行实验室保存。 光学显微镜下观察对峙培养交界处的菌丝形态。
供试生防菌:79株木霉菌(Trichoderma1.4木霉茵对杀菌剂的耐药性
spp.),
分离自辽宁药用植物种植基地根际土壤中。 采用生长速率法,经预试验后将不同药剂分别
供试杀菌剂:50%多菌灵可湿性粉剂(江阴市 按不同浓度与溶化的PDA培养基混匀制成含药培
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