汉族人群血管紧张素转换酶基因插入%2f缺失(I%2fD)多态性研究.pdfVIP

表现为DNA条带的缺失、增加和条带强度的差异．用同样的方法检测不同的肿瘤类型，有的 作者报道68％，58％和100％地检测出肿瘤指纹和正常指纹有差别”’，且指纹条带的多少和具体 条带的差异都没有可比性，除了由于肿瘤本身的特性之外。各实验室的实验条件没有统一的 标准，造成各研究者的指纹数据没有通用性”1。 肿瘤DNA指纹的改变是通过与正常组织细胞DNA指纹对比而得出的．因此在DNA指纹分 析中正常对照至关重要。目前的研究者大多采用癌旁正常组织和外周白细胞。我们的结果显 示24例肺癌中只有10例表现出肿瘤组织DNA指纹与正常指纹有差别，这一比例较低，除了 跟模板DNA提取有关外。肿瘤组织和正常组织没有很好地区分也是可能的原因。恶性肿瘤普 遍与正常组织分界不清，这样就容易造成肿瘤和正常组织的混杂。在作DNA指纹分析时可能 表现为正常。外周白细胞DNA指纹是比较好的正常对照，取材也简单方便，但当肿瘤外周转 移时，大量的肿瘤细胞可能会改变作为正常对照的白细胞DNA指纹。我们在实验中就发现两 例标本，白细胞DNA指纹和肿瘤DNA指纹一致，而两例肿瘤都已发生转移，其白细胞的异常 DNA指纹可能是肿瘤转移所致。因此，有学者提出用表皮纤维细胞作正常对照来避免以上的问 题。 在肺癌发生过程中，DNA分子的损伤被认为是先于形态学损伤的”1。伴随化生，发育异常 和原位癌等癌前病变的损伤是随机的，可以向不同年龄、不同部位发展，也可以停留在当前 等级上或消退，因此从形态学等级上不能明确地预测癌前损伤的结果。当前的假设是：不同 阶段的分子损伤可能反映了形态学进展的趋势。我们建立的DNA指纹分析法可以检测不同阶 段癌前损伤的DNA分子改变，希望能够通过大量的实验数据，能够发现癌前损伤发展，停留 或消退的特定指纹，给临床医生对不同等级癌前损伤作正确处理以参考。实验中的第16号标 本良性肿瘤的DNA指纹有较大的改变，我们将继续随访该患者，密切关注该良性肿瘤是否有 恶变的趋势。 本实验中应用ALU．PcR的方法分析肺癌组织的基因组改变，检测到肺癌组织与其对应正 常组织基因组之间的DNA指纹改变是多样性的，未能发现提示预后的特异性的指纹条带。 汉族人群血管紧张素转换酶基因插入／缺失(I／D) 多态性的研究 高纯，顾国浩 (苏州大学附属第一医院检验科。江苏苏州215006) 血管紧张素转换酶(AcE)是肾素一血管紧张素一醛固酮系统(RAS)的重要组成部分．既 可裂解血管紧张素I(AI)转化为具有强烈促血管收缩和刺激醛固酮的肽类血管紧张索Ⅱ(A II)，并且可灭活缓激肽以催化其他一些活性肽…．ACE可固定于内皮细胞、上皮细胞以及神 经内皮细胞的膜上，也可以血浆、羊膜液或者精液的形式存在．ACE基因位于染色体17q23 上，由26个外显子和25个内含子组成，第16内含子内存在一个287bp的Alu序列的插入／ 缺失(I／D)多态性“1。研究表明，ACE基因I／D多态性与心血管疾病、IgA肾病等疾病的发 生具有一定的相关性o“】．本文采用聚合酶链反应扩增该多态性序列，检测了ACE基因Z／D 多态性的等位基因和基因型，研究汉族人群该位点的遗传多态性． 1材料与方法 1．1研究对象 241例受检者为门诊健康体检者，经I临床及实验室检查确认．其中，男性152例，女性 89倒，年龄为19—35岁(平均27±8岁)，均为无血缘关系的苏州地区汉族人，排除肝、肾、 内分泌、心脑血管等疾病。 1．2方法 1．2．1模板DNA的制备 1．2．2PCR扩增 PCR反应引物参照文献“3的设计，由上海生工合成，序列为： P1：57一CTGGAGACCACTCCCATC咖CT一3’ P2：57一GATGTGGCCATcAcATTCGTcAGAT一3’ 反应体系为50 200 u1，其中含模板DNAng，TaqDNA聚合酶1．0U，引物Pt、Pz各0．1 55C2min、72％：2min，进行30个循环．最后，72℃延伸10min。 I．2．3电泳及结果判定 取7肛1PCR扩增产物，加入3“l6×载样缓冲液，混匀，上样子2％琼脂糖凝胶IOOV 电泳20min。据DNA梯度分子标志物判定样品基因型。 1．2．4目的DNA片段序列分析 以基因型为D／D、I／I的PCR纯化产物及引物Pz作为测序反应的模板与引物，采用荧