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中华中医药学会中药分析分会第六届学术交流会论文集
基于ANOVA和OPLS的二至丸预防大鼠急性酒精性肝损伤的尿
液代谢组学研究
姚卫峰，何睦1，张丽1，丁安伟1，2
(1．南京中医药大学药学院2．江苏省方剂高技术研究重点实验室江苏南京210023)
代谢组学(metabonomics)作为系统生物学的一个重要分支近年来受到广泛的关注，其
研究的最终目标了解外源性物质对人体代谢的调节规律，如检测饮食、药物和疾病对生物体
液和组织中的代谢物水平的变化。代谢组学通过检测分析生物体液和组织成分，从而寻找出
潜在的生物标志物。本文通过快速分离液相色谱一串联四极杆飞行时间质谱(RRLC—Q—TOF／MS)
技术并结合ANOVA和OPLS—DA方法，对各组大鼠尿液中的内源性代谢物变化进行分析辨识，
并与常规的OPLS—DA分析方法的结果进行了比较，寻找各组大鼠体内潜在标志物，探寻了二
至丸治疗大鼠酒精性肝损伤的作用机制。
1实验方法
1．1样本的采集(略)
1．2样本的处理
min，13000
尿液的处理方法：取0．3m1尿液，加入0．3ml甲醇，涡旋30s，4℃静置lO
r·minl离-g,lOmin，取上清液。
1．3分析条件
1．3．1色谱条件
lentPoroshell120
Agilent公司1290系列液相色谱系统，色谱柱：Agi EC—C18柱(2．1
mmX100mm，2．7m)；流速：0．4mL·min～；柱温：40℃；自动进样器温度：4℃；进
lJ
样量：5 L；流动相A：O．1％(v／v)的甲酸水溶液，流动相B：含0．1％(v／v)甲酸的乙
lJ
腈；梯度洗脱程序
1．3．2质谱条件
离子(ESI一)模式扫描，使用高纯N。作为辅助喷雾电离与脱溶剂气体，N2温度325。C，干燥
气流速8L·min～，雾化气压40psig，参比电喷雾口雾化气压5psig，毛细探针电压4000
V，溶剂化离子去簇电压120V，锥孔电压65V，采用Centroid模式进行质谱数据采集，采
集速率为1．4spectrum·S～，数据采集中不间断吸入含嘌呤(m／z121．0509)和Hexakis
(m／z i00—1700。
922．0098)的校正液进行实时质量轴校准。质量扫描范围：m／z
【基金项目】国家自然科学基金项目；教育部博士点新教师基金项目(20103237120010)；
E-mail：weifengyao@njutcm．edu．cn．
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中华中医药学会中药分析分会第六届学术交流会论文集
1．4数据处理
1．4．1数据预处理(MZmine2．2)
ANOVA)
1．4．2单因素方差分析(one—way
2结果与讨论
2．1OPLS-DA分析
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