杆状病毒转移载体的构建及绿色荧光蛋白在斜纹夜蛾幼虫中的表达 推荐.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’() *! +( *# 年 月 !$$% !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 ,-). !$$% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 杆状病毒转移载体的构建及绿色荧光蛋白在斜纹夜蛾幼虫中的表达 !#$%’(%)# * + ,+(’-.)’$ /+#$*0 10(% +#2 3450$$)# * ,+(’-.)’$6702)+%02 !# 80#0 )# 9+.+0 * $# %%# ’()* +,’-)* ! 胡兆丽 ，王文兵 ，朱 江 ，李新平 ，沈颂东 ! ， ， ， TG U8(OV2 W9+X W0HOJ2HM UTG ,28HM VY I2HOB2HM 8H4 ETP+ E(HMOZ(HM * 苏州大学生命科学学院，苏州 !%$$K ! S 江苏大学生命科学研究院，镇江 !!$ ， ， ， * 3#- % 40#%$0% 40((, 4)5() 6$#7%*#/2 4)5() !%$$K !#$+ ， ， ， ! S 8$/#/)/% (- 3#- % 40#%$0% ’#+$1) 6$#7%*#/2 9%$: #+$1 !!$ !#$+ 摘 要 为构建斜纹夜蛾核型多角体病毒 （ ）的重组病毒，以该病毒日本 株基因组 为 扩增模板，根据 E:);[+B’ L Z+9 BL/ 中国 株基因序列，设计了两对引物分别扩增多角体蛋白基因的 端侧翼序列（含启动子）和 端侧翼序 X0HJ8HA E:);[+B’ X! %\ \ 列（含终止子），将这两个片段依次克隆于 质粒载体后，再将绿色荧光蛋白（ ）基因亚克隆到上述载体的多角体蛋白 :GLN X5B 基因启动子和终止子之间，获得转移载体 。将 与野生型 基因组 共转染 细胞，通过同源重 :E:);O1-; :E:);O1-; E:);[+B’ Z+9 E:)2 组和有限稀释法筛选，获得了以1-; 基因替代多角体蛋白基因的重组病毒 E:);[+B’O1-; 。E:);[+B’O1-; 感染E:)2 细胞和斜纹 夜蛾幼虫，分别在感染 和 后可发现绿色荧光蛋白的表达。该重组病毒的获得，为建立斜纹夜蛾核型多角体病毒表达