盐酸克仑特罗单克隆抗体的制备及特性鉴定.pdfVIP

2007 6 31 3 BullAcadMilMed Sc,i Jun 2007; Vol 31 No 3 243 1, 2 1 1 1 2 1* , , , , , ( 1.军事医学科学院放射与辐射医学研究所, 北京 100850; 2. 吉林农业大学动物科技学院,长春 130118 ) [] : 制备抗盐酸克仑特罗( clenbuterol, CL)的单克隆抗体并进行免疫学特性鉴定:用重氮化法将 盐酸克仑特罗偶联于 体牛血清白蛋白( BSA), 形成的结合抗原 BSACL作为免疫原免疫 BALB/c小鼠, 同时将 CL 与卵清白蛋白 (OVA)偶联制备检测原(OVACL) 应用杂交瘤技术建立分泌抗盐酸克仑特罗单克隆抗体的杂交瘤 细胞株, 体内诱生腹水并进行纯化用竞争性 ELISA法测定抗体的亲和常数及交叉反应性: 获得了 18株稳定分泌抗盐酸克仑特罗单克隆抗体的杂交瘤细胞株,挑选其中E9C11C11E3E7G8三株高亲和力的细胞 株进行免疫学特性鉴定三株抗体的亚类均为 IgG 细胞上清的间接 ELISA效价分别为 11280110001800, 1 - 6 - 8 - 8 - 8 三株腹水效价都约为 1 10 亲和常数分别为 2. 4 10 mol/L2. 83 10 mol/L3. 28 10 mol/LE9C11 单抗对 CL的 IC 为 6. 1035g/L; 对沙丁胺醇的 IC 大于 781. 25 g/L, 交叉反应性小于 0. 78%; 对肾上腺素去甲 50 50 肾上腺素异丙肾上腺素莱克多巴胺及部分维生素和抗生素均无交叉反应性蛋白免疫印迹分析证明三株单抗 特异性均很高, 可用于与其相关的免疫检测或应用研究 [] 盐酸克仑特罗; 酶联免疫吸附测定;抗体, 单克隆;杂交瘤 [] Q8132 [] A [] 2007) Preparation and characterization ofmonoclonal antibody to clenbuterol 1, 2, 1 1 1 2 1* LI L iYan , ZH U J ie , X IN G R u iYun , F U H anJ iang , JIAN G X iuYun , ZH EN G X iao Fe i ( 1. Institute ofRadiationMedicine, Academy ofM ilitaryMedicalSciences, Beijing 100850, China; 2. Jilin AgricultureUni versity, Changchun 130118, China) [Abstract] Objective:To produce and identify monoclonal antibodies against clenbuterol( CL). Methods: CLconjuga ted antigens ( BSACL and OVACL) were produced by coupling diazotized CL w ith bovine serum album in ( BSA) and ovalbumin( OVA), respectively. Hy