分子生物学基础 教学课件 作者 臧晋蔡庄红 主编 杨百梅 主审 第七章.pptVIP

尚辅网 尚辅网 分子生物学基础 第七章　真核基因表达的调控 第一节　概述 一、真核基因表达调控的特点 真核细胞与原核细胞在基因转录、翻译及DNA的空间结构方面存在很大的差异，主要表现在以下几个方面。 ①在真核细胞中，一条成熟的mRNA链只能翻译出一条多肽链，不存在原核生物中常见的多基因操纵子形式。 ②真核细胞DNA与组蛋白和大量非组蛋白相结合，只有一小部分DNA是裸露的。 ③真核细胞中存在着一部分由几个或几十个碱基组成的DNA序列，它们在整个基因组中重复几百次甚至上百万次，高等真核细胞DNA中很大一部分是不转录的，大部分真核细胞的基因中间还存在不被翻译的内含子。 第一节　概述 ④真核生物能够根据生长发育阶段的需要进行DNA片段的有序重排，还能在需要时增加细胞内某些基因的的拷贝数，这种能力在原核生物中是极为罕见的。 ⑤原核生物中，转录的调节区都很小，大都位于启动子上游不远处，调控蛋白结合到调节点上后可直接促进或抑制RNA聚合酶对它的结合。而在真核生物中，基因转录的调节区则大得多，它们可能远离启动子达几百个甚至上千个碱基对。虽然这些调控区也能与蛋白质结合，但是并不直接影响启动子区对RNA聚合酶的接受程度。这些调节区一般通过改变整个所控制基因5上游区DNA构型来影响它与RNA聚合酶的结合能力。 ⑥真核生物的RNA在细胞核中合成，只有经转运穿过核膜，到达细胞质后，才能被翻译成蛋白质，而原核生物中不存在这样严格的空间间隔。 ⑦许多真核生物的基因只有经过复杂的成熟和剪接过程，才能顺利地翻译成蛋白质。 第一节　概述 二、真核生物基因结构与转录活性 1．简单多基因家族 2．复杂多基因家族　 3．发育调控的复杂多基因家族 第二节　真核基因表达DNA水平的调控 一、基因丢失 在有些细胞分化过程中，可以通过丢失掉某些基因而除去这些基因的活性。某些原生动物、线虫、昆虫和甲壳类动物在个体发育中，许多体细胞常常丢失掉整条或部分染色体，只有将来分化产生生殖细胞的那些细胞一直保留着整套的染色体。如马蛔虫受精卵有2条染色体，当个体发育到一定阶段，分化为体细胞的那些细胞中的染色体断裂为小的片段，有着丝点的小片段保留下来，其它的不能分配到下一代而失去，基因的丢失决定了细胞的寿命。但在高等生物的细胞分化中尚未发现基因丢失现象。许多生物体分化的细胞其细胞核内保存了个体发育所必需的全部基因，这些细胞具有经去分化和再分化而发育成完整个体的潜在能力，这种能力称为全能性。 第二节　真核基因表达DNA水平的调控 二、基因扩增 基因扩增是指某些基因的拷贝数专一性大量增加的现象。基因扩增使细胞在短期内产生大量的基因产物，以满足生长发育的需要，基因扩增是基因活性调控的一种该式。最早发现的是蛙的成熟卵细胞在受精后的发育过程中其rRNA基因（可称为rRNA）可扩增2000倍，以后发现其它动物的卵细胞也有同样的情况，这很显然适合了受精后迅速发育分裂，要合成大量蛋白质需要大量核糖体。 第二节　真核基因表达DNA水平的调控 三、基因重排 第二节　真核基因表达DNA水平的调控 交配型转换首先是核酸内切酶HO在MAT基因内部一个24bp序列处切开双链DNA，自由的3末端又在DNA聚合酶的作用下以上游（或下游）HMLα基因为模板合成双链DNA，直到完全置换所有的MATa基因，完成性别转换，如图7-2所示。 第三节　真核基因表达转录水平的调控 一、真核基因转录与染色质结构变化的关系 DNA绝大部分都在细胞核内与组蛋白等结合成染色质，染色质的结构影响转录，至少有以下现象： 1．染色质结构影响基因转录 在真核细胞中以核小体为基本单位的染色质是真核基因组DNA的主要存在方式。DNA盘绕组蛋白核心形成核小体，妨碍了与转录因子及RNA聚合酶的靠近和结合，使基因的活性受到抑制。 2．组蛋白的作用 组蛋白H1及核心组蛋白共同参与核小体的组装与凝聚。在特殊氨基酸残基上的乙酰化、甲基化或磷酸化等修饰，可改变蛋白质分子表面的电荷，影响核小体的结构，从而调节基因的活性。 第三节　真核基因表达转录水平的调控 3．DNA拓扑结构变化 天然双链DNA的构象大多是负性超螺旋。当基因活跃转录时，RNA聚合酶转录方向前方DNA的构象是正性超螺旋，其后面的DNA为负性超螺旋。正性超螺旋会拆散核小体，有利于RNA聚合酶向前移动转录；而负性超螺旋则有利于核小体的再生成。 4