流动注射化学发光法测定人血清蛋白研究.pdfVIP

第30卷专辑 南昌大学学报(理科版) V01．30 Suppl of Journal 2006年9月 NanchangUniversity(NaturalScience) Sept．2006． 文章编号：1006一0464(2006)专辑一1097—20 流动注射化学发光法测定人血清蛋白的研究 訾言勤，赵丹华，陆丽园，袁秀香 (淮北煤炭师范学院化学系，235000) 摘要：化学发光技术在生物技术、分子生物学、药学、临床和环境等许多领域都获得了广泛的应用，有关化学发光 的评论文章近年来也有许多报道；本论文采用流动注射技术，研究了高锰酸钾一吖啶橙一人血清蛋白体系在氢氧 化钠介质中的化学发光行为，对影响化学发光行为及化学发光机理进行了探讨；对影响化学发光的因素进行了实 验和优化，建立了化学发光测定人血清蛋白的新方法。结果表明：在1．0—8．0me／L(即6．57×10一～5．26×10” mol／L)范围内，人血清蛋白的浓度与发光强度有良好的线性关系。方法的检出限为4．1×10一S／mL，相对标准偏 差为0．682％(2．0us／mL，n=11)。这种方法简单，快速，灵敏度高，结果令人满意，有相当高的研究价值。 关键词：流动注射；化学发光；高锰酸钾；吖啶橙iX血清蛋白 中重分类号：0657 文献标识码：A 吖啶橙是发光剂，其浓度影响体系的发光强度； l 实验部分 在高锰酸钾的浓度为5．0×10一mol／L，氢氧化钠的 1．1仪器和试剂 浓度为3．0mol／L，人体血清蛋白的浓度为5mg／L IFFL—D型流动注射化学发光仪(西安瑞科电时，对浓度为5×10一一1．0×10qmoL／L进行了实 子设备有限公司)。电子天平FA2004型(上海良平 仪器仪表有限公司)。正常人血清蛋白(BR，生化试吖啶橙浓度的升高而增大；吖啶橙浓度为2．0× 0 剂，上海文昊生化科技有限公司)。称取0．025g 10。mol／L时，人体血清蛋白对发光强度有最大的 人体血清蛋白用水稀释后转入250mL容量瓶中，用 增强作用，在3×10一一5×10“moL／L时，人体血清 水稀释至刻度，配成100I山g／mL，作为储备液；吖啶 蛋白对发光强度的增强作用几乎不变；5×10一一1． 橙(分析纯，上海化学试剂采购供应分装厂)，称取 0×10一mol／L，对发光强度的增强作用逐渐减小。 0．7545 mL烧杯中，加水溶解， 故本实验选择吖啶橙的浓度为2．0×10一mol／L。 g吖啶橙，置于100 mL配成浓度为1．0×10≈mo]／L的储2．2高锰酸钾浓度的影响 定容至250 备液；高锰酸钾(分析纯，徐州试剂厂)，称取3．9505 在选定的条件下，即吖啶橙浓度为2．0×10J mL烧杯中，加水溶解，定容至250moL／L。高锰酸钾是反应中的氧化剂，高锰酸钾的浓 g高锰酸钾于100 mol／L氢 mL配成浓度为0．1moL／L的储备液；5．0 度对化学发光强度有较大影响，同时还影响测定的 氧化钠溶液；使用时稀释至所需浓度。其余均为分 线性范围和灵敏度。按实验方法，仅改变高锰酸钾 析纯或生化试剂；水为二次蒸馏水。 1．2实验方法 酸钾浓度的增大，发光强度亦在增大，但高锰酸钾浓 启动仪器，输入实验参数。步骤1：时间3s，主 泵速度0，副泵速度95，阀位采样，不采集数据。步 对发光强度增强作用逐渐增大且趋于平稳。