秦川牛与其杂种牛H-FABP基因PCR-RFLP多态性研究.pdfVIP

426 第十次全国畜禽遗传标记研讨会论文集 薛恺1，陈宏1，蛐，王珊1，蔡欣1，房兴堂2 (1．西北农林科技大学动物科技学院陕西省农业分子生物学重点实验室陕西杨凌712100；2．徐 州师范大学细胞与分子生物学研究所，江苏徐州221116) 摘要；本研究首次利用PcR—RFLP技术研究相同季节4月(±10d)龄纯种秦川牛(QQ)及 4个群体164个个体H-FABP基因的多态性．结果 杂种牛秦安(AQ)、秦德(DQ)，秦：手J(L03 bp的PCR产物被觑Ⅲ限制 表明，QQ及AQ、DQ、LQ群体H-FABP-HaeHI基因座的2075 性酶消化后表现多态性，它们的等住基因A／B频率分别为：0．232／0．768，0．333／0．667， 0．178／0．822和0．18I／0．819，且均处于Hardy-Weinberg平衡状态。 关键诃：H-FABP；遗传多态性；限制性片段长度多态性(RFLP)；秦川牛 近几年来我国肉牛生产发展很快，但生产水平较低，平均产肉率不高，其中一个重要原因是迄今我 国还没有一个自己培育的专门化肉牛品种。要大力发展我国的肉牛生产，除了利用国外优秀的肉牛品种 杂交改良我国地方黄牛外，还必须培育自己的肉牛品种。由于所有肉质性状难以进行活体测定，并且与 生长性能存在不同程度的负相关，因此探寻和利用影响牛肉性状的主效基因是目前进行肉质选育的主要 acid 途径。研究结果表明，心脏脂肪酸结合蛋白(}le叭fattybinding (㈣沉积的主效基因，它所编码的蛋白是一类低分子量(约15kDa)的胞浆蛋白，主要作用是将脂肪酸 从细胞膜运送到16氧化和三酞甘油及磷脂合成的部位，H-FABP在细胞内与脂肪酸结合，使细胞内外保 红肌细胞内，而在其他组织中为少量或无H-FABP分布。因此H．FABP基因对肌内脂肪的沉积具有较直 异与肌内脂肪含量存在相关“】。李武峰等研究表明可把H-FABP基因作为影响牛肉品质大理石花纹IMF 即含量的候选基因…。 本实验利用PCR-RFLP技术对中外4个牛种H-FABP基因的第二内含子的遗传变异作一比较研究， 为进一步分析H-FABP基因遗传变异与肌内脂肪含量的关系及其在育种计划中的应用奠定基础。 1材料和方法 1．1试验材料 初生于相同季节的4月(±10 d)龄纯种秦J|件(QQ血样67份，秦安杂种牛(秦川牛早x红安格 用。参照CHE等的方法提取DNAl31。分光光度计测定浓度后，．80℃保存。 1．2方法 H-FABP基因引物由上海生工生物工程公司合成，引物序列如下：Ph u TCGAAGTGAA--3r；P2：5，一cAAGTGAl『GⅡ邛唧1℃CATrCCA--3’。25uLPCR反应体系包括2 教育创新基金(No．05YCH018)资助。 Animal Bulletin Bioteclmology s，72℃延 s，65℃复性45 上下游引物各05pmoFL。PCR反应程序：95℃预变性5mm；，94℃变性30 伸2rnm，35个循环后，最后72℃后延伸10min。 利用限制性酶HoeIII对PCR扩增产物进行酶切后聚丙烯酰胺电泳，凝胶成像系统拍照；确定酶切 图谱的基因型。基因频率和基因型频率及X2检验，多态信息含量(PIC)，有效等位基因数(Ne)和位点 杂合度(h)计算参见文献[4]。 2结果与分析 21PCR扩增 H-FABP基因的PCR扩增片段长度为2075bp，包括该基因第2内含子；1％琼脂糖电泳检测，扩增 片段与目的片段大小