抗肿瘤药物筛选课件.pptVIP

步骤： （1）制备单细胞悬液； (2)对细胞计数后接种于96孔板，一般5000个/孔（可先做细胞倍增试验确定每孔中最佳细胞数）； （3）将培养板放入CO2培养箱，过夜培养； （4）24h后更换培养基，并在每孔细胞中加入不同浓度药物，继续培养； （5）24或48h以后，加入MTT溶液，再培养3-6h,停止培养，弃取培养基,加入DMSO，每孔150ul，轻微震荡混匀； （6）把96孔板放入酶标仪中，490nm测定吸光度。 注意：设好对照 3.抗代谢法 抗代谢物在无机氮源的合成培养基中显示抗菌作用，而在普通有机氮源的营养培养基中无抗菌作用（因为有机氮源可将具有抗菌作用的物质代谢），利用此特点，选择无机氮源试验有抗菌作用的物质，作为抗代谢的初筛方法。  常用宿主动物： 裸小鼠 （“活的试管”） 特点：先天无毛，无胸腺，T淋巴细胞功能 完全缺失，对异种移植不产生排斥反应。 缺点：费用高，饲养条件高，不宜大量繁殖。 一般不用于初筛。 应用：观察药物对癌细胞逆转作用， 抑制增殖及诱导凋亡作用。 C57BL/6小鼠 特点：黑毛，体型小，性情温顺， 易饲养，药敏性好，为研究