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遗传育种 2007--2008年全国养羊生产与学术研讨会议论文集 171
绒山羊KAP9。2基因多态性研究
于 辉1,王 昕1.陈 宏“2,王 谋1,赵 苗1,蓝贤勇1,王柯忆1,赖新生1,王鑫磊1
(1.西北农林科技大学动物科技学院陕西省农业分子生物学重点实验室,杨凌712100;
2.徐州师范大学细胞与分子生物学研究所)
摘要:角蛋白可分为软角蛋白和硬角蛋白.毛纤维主要是由硬角蛋白中间微丝角蛋白(IFKeratin)和微丝角蛋白相关蛋
associated
白(keratin
硫角蛋白相关蛋白基因家族在连接中问微丝角蛋白中可能起到重要作用。文章首次时997个绒山羊个体KAP9.2基因的
遗传多态性进行了分析。结果表明:在内蒙古白缄山羊和陕北白缄山羊个体中均出现ww、WY、YY3种基因型,其基因
该位点上呈现低度多态(PIC=0.191)。进一步的测序结果显示,在KAP9.2基因上存在30bp的缺失突变。
关键词:绒山羊;KAP9.2基因;缺失突变
角蛋白可分为软角蛋白和硬角蛋白,毛纤维主要是由硬角 785个内蒙占白绒山羊个体耳组织样取白于内蒙古自治区
蛋白中问微丝角蛋白(IFKeratin)和微丝角蛋白相关蛋白绒山羊繁育中心.212个陕北白绒山羊个体耳组织样取自于陕
(keratinassociated
protein)组成。1993年,罗杰斯和鲍威尔等西省榆林市横山县陕北白绒山羊种羊场。
用不依赖物种的缩写词命名角蛋白相关蛋白8个成员KAPl.n
1.2 药品及基因组DNA的提取
至KAP8.n.这8个成员的分类是根据这些蛋白质序列的阔源 Taq
型和经常出现的蓖复结构进行划分的。从那时起,许多新的绵
羊、兔子、老鼠和人的KAP成员被发现。 提取参照Sambrook等方法。
角蛋白相关蛋白依据氨基酸的成分,基本上分为3类,高硫
1.3 PCR引物设计
KAP,超岛硫KAP和高甘氨酸/酪氩酸KAP。目前,这3个家
族更进一步分为23个亚家族。依据氨基酸一致性和它们各自的
AY510124),设计引物.由上海生物工程公司合成。引物序列如
重复结构的特征,KAPl—3和KAPl016,23家族属于高疏
下:
KAP,KAP4、5、9、17属于超高硫KAP;KAP6—8,18—22家旗为
高甘氨酸/酪氨酸(HGT)角蛋白。有资料表明,KAP基因家族
下游引物:5’。ACAGGGGCACAGTAAACC3’
的所有基因均不含内含子。
1.4 PCR反应条件
超商硫KAP在毛发的形成过程中起到了重要的作用。人
25 u
pL反应体系。包括1Taq
类超高硫KAP中所含有的商水平的半胱氰酸.被认为可能在
2.5 mmol/L 1.5 mmol/LdNTPs2.5
pL,25 MgCl2pL.2.5 pL,
连接中间微丝角蛋白(KIF)中起到重要作用。而且,人类部分
100
ng绒山羊基因组DNA,10
pmol/t-L上、下游引物各0.25
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