小儿Dent病临床特征与基因突变研究.pdfVIP

／J、JLDent病临床特征和基因突变研究 北京大学第一医院儿科(100034)黄建萍 [摘骥]目的Dent病是一种遗传性肾小管疾病，主要特{芷有小分予量蛋白尿，高钙尿症和肾脏钙化等。Dent瘸的主要 床特征和分子遗传学特点。方法以三例拟诊的Dent病患儿及其家系中的女性为研究对象。盐析法从外周血白细胞提取基 因组DNA，PCR扩增C￡￡N5基嚣所有的编码序列，PCR产物囊接测枣。结果兰铡患凡均有小分子量蛋囊尿和鬟钙尿症， 其中两例有肾脏锊化，两例有低磷血症，三例肾功能均正常。谯这三个家系发现了三个CLCN5基因的突变，分别为R467X、 Dent瘸的 主要临床特征：酋次证实了我国Dent病患儿存在CLCN5基因的突变；报道了CLCN5基因的一个新的突变。 Dent病(Dent’S disease)是一种X连锁隐性遗传性肾小管疾病，其主要特征有小分子薰蛋白尿、高钙 尿症和肾脏钙化，部分病人可出现肾功能异常或肾衰。该疾病于1964年首先被Dent报道，并随着分子生 物学技术的发展，己认识该病的主要致病基因为CLCN5。蠢于国内对该病的研究较少，对其认识不足， 易导致漏诊、误诊。本文探讨国内d,Jt,Dent病患儿的临床特征和分子遗传学特点。 l对象与方法 1．1对象 三铹患儿被摈诊为Dent瘸，诊断标准符合以下3条：(1)小分子量蛋岛渌，邸尿锄徽球蛋白鞠显升 4mg／kg：3)至少有下捌情况之一：臀钙佬、肾石症、盘尿、低磷血症、肾功毵不全。 先证者l，男，1l岁，4岁时因“发热伴腹泻”入当地医院，给予“庆大霉素”肌肉注射，3大后症状 缓解，健发现臀部霆惩究注射部位感染并形成脓肿，阕时发现艨蛋童3+，24小黠尿蛋自定量1．锺。臀部经 切开引流并抗炎治疗后3月愈，尿蛋白持续存在，0．7～1．59／d。4．5岁开始按“肾炎”先后给予泼尼松、环 磷酰胺、环孢素A等药物治疗半年，蛋自尿燹好转。5岁时采我院藏诊，24小时尿蛋白1．509／d，尿小分 小管闽质轻度损伤。 先证者2，男，12岁，8岁时因上呼吸道感染于当地医院检查尿常规，发现尿蛋白2十，诊断为“肾 先诞者3，男，12岁，ll岁时在体检中发现尿蛋白阳性，遂到上级医院就诊，24小时尿蛋白0．919／d， 近1年的治疗履无效，遂来我院就诊。 1．2 CLCN5基因突变检测 取得知情同意后，分别静脉采集三例患儿及其家系女性成员5ml外周衄，盐析法提取基因组DNA。 Ira、 PCR 5pmol／ra上下游引物备lm、2XTaq ·———591．-—— 3730XL 产物在ABI DNA测序仪(AppliedBiosystems，USA)上直接双向测序。 2结果 在这三个家系分别发现了CLCN5基因的三个突变。 先证者1CLCN5基因编码序列第2073位碱基G缺失(e。2073delG)，其母为杂合携带者；该缺失突 变将导致读码移位，终止密码子提前出现，即L594fsX595。 先证者2 携带该突变；该突变为无义突变，即R637X。 变为无义突变，即R467X。 3讨论 1964年Dent等报告了2例英国男孩有肾小管功能障碍，表现为肾小管性蛋白尿，氨基酸尿，高钙尿， 的几十年间，几个和Dent病临床特征相似的临床综合征先后被报道，包括X连锁隐性肾石病(xRN)，X 连锁性隐性遗传性低磷酸盐氟症性绚偻病(Ⅺ。RH)藕墨本，L童特发性低分子量蛋囱尿(JlL艇WP)。这歹乙 种综合征都主要为男性受累，都有肾小管功能异常，包括小分子量蛋白尿和高钙尿症。近年来，随着分子 生物学技术的发展，发现这儿耪综合征都是哟同一个致病基因CLCN5的突变所致，敖现在认为它们是同 一种疾病的不同表现形式，目前统称为Dent病。 离子通道蛋白家族成员。在入类，发现CLC．5蛋自在近端小管、皮质集合小管和髓襻升支粗段均有表达。 的过程即胞吞作用需要CLC．5蛋白的参与完成。