Notch信号通路在体外培养的鹿茸干细胞中的表达.pdfVIP

Notch信号通路在体夕培卜养的鹿茸干细胞中的表达 耿涛 ，杨福合 ，邢秀梅 z，褚文辉 z，孙红梅 z，李春义 z (1．江苏科技大学，江苏 镇江 212018； 2．中国农业科学院特产研究所，吉林 吉林 132109) 摘要：Notch信号通路是一条进化上十分保守的信号转导系统，在调节干细胞增殖、分化和凋亡方面起到重 要作用。研究表明，鹿生茸区骨膜和角柄骨膜分别含有鹿茸发生和再生的干细胞。应用RT-PCR的方法对离体培 养生茸区骨膜和角柄骨膜细胞进行检测 ，得出Notch信号通路各信号因子在 2种细胞中的表达情况。结果 ： Notch一1、Notch一2、Notch-4、Dll一4、Jagged一1、Jagged一2、Hes一1等信号因子在这2种干细胞中均有不同程度的表达， 说明Notch信号通路可能参与了他们的增殖、分化的调控。 关键词：Notch信号通路；生茸区骨膜；角柄骨膜；鹿茸再生 鹿角是哺乳动物 中唯一能够再生的器官，是研 近细胞产生的配体的活化作用下，通过一系列分子 究器官再生的良好的生物学模型。鹿茸虽然为鹿头 间的相互作用 ，精确地调控各谱系细胞的增殖分 部的骨质衍生物，但其生长和脱落都在永久性的骨 化。Notch信号转导通路由受体、配体和DNA结合 桩，即角柄上进行。研究表明，生茸区骨膜(AP)是角 蛋白3部分组成。果蝇中存在Notch受体和2个配 柄和鹿茸发生的组织基础，而角柄骨膜(PP)则是鹿 体Delta和Serrate。哺乳动物中有4个同源Notch 茸再生的组织基础。进一步的研究证明，AP和 PP 受体和 5个同源配体。其中，同源受体是Notchl一4， 细胞是具有多种分化潜能的干细胞Il，21。在干细胞增 同源配体有 2类：Delta样配体，分别为Dill、Dll3、 殖分化调控中，信号通路是 目前大多数学者研究的 Dll4；Serrate样配体，分别为 Jagged1和 Jagged2~31。 方向，并在干细胞中发现了多条信号通路。因此，在 DNA结合蛋白(hairyenhancerofsplit，HES)是notch AP、PP细胞中可能存在有 1条或者多条信号通路 通路中一种重要的下游靶基因的产物。它是一类含 来控制其 自我增殖和分化。研究AP和PP2种细胞 有特征性 Ot螺旋一环 一螺旋 (0【HLH)结构的 增殖分化的调控机制对研究鹿茸再生，进而研究器 DNA结合蛋 白 i4]。目前，在脊椎动物中已克隆了 官再生具有深远的意义。 HES1—6共 6种 HES分子，其中HES1分子表达最 与鹿茸再生模型相近的是啮齿类动物的切牙 为广泛，对其研究也较为深入嘲。HES分子可结合在 模型。大鼠的切牙终生不断生长萌出，是一类特殊的 特定分化效应基因的启动子上，与转录共抑制分子 牙齿13]。白玉娣等H研究表明，Notch信号途径存在于 TLE形成复合物，从而抑制靶基因的转录，在调节多 体外培养的根尖蕾细胞中，可能与其中干细胞的增 种细胞分化、增殖的Notch信号途径中起关键作用 [61 殖、分化功能相关，在维持干细胞的分裂、增殖方面 。 Notch信号主要通过促进HES1和HESS基因的 起作用。Notch是进化高度保守的细胞间信号分子， 转录而下传。HES1、HES5的表达受Notch信号的调 决定其邻近细胞命运。通过结合配体Delta或Jagged 节17]，因此检测HES1、HESS的表达水平可间接反映 在干细胞和周围细胞间传递信号，其主要作用是抑 Notch信号的强弱罔。 制各种干细胞的分化，促进其分裂增殖 l引。因此， 本试验意在研究Notch信号通路在 AP和PP Notch—delta信号通路可能参与了AP、PP细胞增殖、 细胞的表达情况，为进一步研究该信号通路的