消痰散结方对胃癌组织核转录因子(NF-κB)活性表达影响研究.pdfVIP

第二十一届全国中西医结合学会消化系统疾病学术会议 humantelomericprotein2)形成复合物，参与 显示，Apollo蛋白与端粒相关蛋白1rI球2(the capping 端粒保护。本文在上述研究的基础上，试图阐明Apollo的5’．外切核酸酶介导的端粒保护作用机制。 方法：运用含有插入于染色体4q的外源性端粒重复序列的细胞模型为研究对象，以病毒感染 方式建立5’．夕}切核酸酶失活的Apollo突变蛋白高表达的肿瘤细胞株，通过免疫荧光、染色体原位 杂交和BrdU标记的细胞周期特异的染色体免疫共沉淀法，研究Apollo蛋白的5’-夕}切核酸酶在端粒 复制保护中的作用和机制。 结果：研究证实，Apollo蛋白的5’-夕}切核酸酶活性对端粒内部重复序列的稳定有重要意义， 为染色体复制S期的端粒结构完整性所必需。Apollo能保护插入于远离染色体末端的外源性端粒重 复序列免于被DNA损伤修复机制，进一步证实TRF2结合Apollo的外切核酸酶活性在推动复制叉前 进，以及确保端粒结构完整和功能完善中有不可或缺的使命，反之则会造成原代细胞端粒复制损伤， 从而使细胞退出复制周期，进入衰老或静息期。 讨论：以上这些研究结果展现了端粒保护机制的新模型，即在复制进行过程中，TRF2结合 Apollo的外切核酸酶消除异常基因剪切和基因重组，体现了染色体复制的忠实性和生命体遗传的保 守性。更重要的是，本研究证明了体细胞复制相关的衰老和肿瘤起源不仅与端粒末端盖帽结构的缺 失有关，还与端粒内部结构的复制相关的DNA断裂和重组有关。展望今后，我们将在上述Apollo 和端粒研究的基础上，进一步开展Apollo在胃癌模型中的应用型研究，阐明胃癌肿瘤起源的端粒特 异性分子途径，开拓抗肿瘤相关的基因治疗新方法。 B)活性表达影响的研究 消痰散结方对胃癌组织核转录因子(NF-K 李春杰1 魏品康2 谷素洁1 1中国人民解放军第2ll医院(哈尔滨1500080)； 2上海长征医院(上海200003) 【摘要】 目的：通过建立裸鼠人胃癌MKN．45原位移植瘤模型，观察消痰散结方对胃癌组织 核转录因子(NF．1cB)活性表达的影响，探讨消痰散结方抑制胃癌细胞增殖的作用机制。方法：采 用OB胶粘贴法建立裸鼠人胃癌MKN．45原位移植模型，随机分成模型组，消痰散结低、中、高剂 量组，5．Fu组，每组8只，采用EMSA方法检测胃癌组织NF．r,B活性的表达。结果：①消痰散结 方低、中、高剂量组的平均瘤重与模型组相比，有显著差异(尸o．01)：②消痰散结方低、中、高 剂量组NF．KB的活性表达与模型组相比逐渐降低，且呈明显的剂量依赖效应。消痰散结方低剂量组 的活性表达与模型组相比P如．01，有显著统计学意义，但组间相比无统计学意义：结论：①消痰 散结方有明显的抑制胃癌细胞生长的作用：②消痰散结方可能通过抑制NF—r,B活性而阻断胃癌细胞 增殖进程，可有效抑制胃癌发展。 【关键词】消痰散结方：胃癌；核转录因子：原位移植 NF．r,B与肿瘤的关系是近年来逐步得到人们的重视的，1996年发表在美国‘科学》杂志上的三 第二十一届全国中西医结合学会消化系统疾病学术会议 篇文章指出：抑制NF．KB的活性有助于提高肿瘤坏死因子(TNF)活性。增强辐射和化疗药物杀伤癌 瘤细胞株的能力，其机理与NF．KB可抑制细胞凋亡有关，这为人们提示了新的治疗肿瘤途径u剖。 中药对肿瘤细胞的多靶点效应，是中药抗肿瘤的重要特点和优势。目前中药与NF-KB关系的研究尚 处于初步阶段，消痰散结方为治疗胃癌的经验方，为了进一步探讨其作用机制，本研究采用OB胶 粘帖法建立裸鼠人胃癌MKN．45原位移植瘤模型，通过观察消痰散结方对胃癌组织NF-l(B活性表达 的影响，探讨消痰散结方抑制胃癌细胞增殖的作用机制。 l材料和方法 胃癌MKN-45细胞株，由中国科学院上海实验动物中心提供． 1．2药物消痰散结方：由制南星、制半夏、蛇莓、干蟾皮等组成，购自上海雷允上公司，产地明 确。用旋转蒸发仪煎煮，按人与小鼠换算比计算出低、中和高剂量。5一氟脲嘧啶(5．Fu)购自长征医 院药材科，250rag／支(N0．050608)。