利用苏云金芽胞杆菌细胞表面展示系统表达禽流感病毒NP蛋白.pdfVIP

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 !（）： # !’ ( !)* 年 月 日 $%% ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ! +,-. $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 利用苏云金芽胞杆菌细胞表面展示系统表达禽流感病毒 蛋白 ! ， ， * $ * $ $ * $ 刘 梅 ，李淑云 ，赵昌明 ，孙 明 ，毕丁仁 * $ （华中农业大学动物医学院 农业微生物学国家重点实验室 武汉 !#%%% ） 摘 要：首次利用苏云金芽胞杆菌（ ， ） 层蛋白 表面展示系统研究在 细胞表面展示禽 !#$%%’ ()*$+,$-+’$’ FG H5 I3I FG 流感病毒 蛋白的可行性和最佳方案，为研制能常温长期保藏和运输的禽用口服疫苗奠定基础。用全长 基因 JK +. 或部分 基因（ ）代替 层蛋白 基因的 端或中部，构建了 个重组质粒 （含 ）、 （ +. +.. H5 #(# #L5 ! MHJK #(#5 +. MIH/5HJK #’5#(#5 ）、 （ ）和 （ ）。将重组质粒分别电转化入 受体菌株 中，获得了 个重组 +. MI3I5JKK #(#5 +.. MIHJKK #’5#(#5 +.. FG F1F** 0 菌株 、 、 、 和 。用 个重组菌株的营养细胞做玻片凝集试验，结果显示 个重组菌株均成功地在 FJ FIJ I5H FIIJ IJ 0 0 细胞表面展示了 蛋白。用 个重组菌株的营养细胞免疫小鼠， 测定血清抗体效价，结果显示 个重组菌 JK 0 92NH/ 0 株均具有免疫原性，其中重组菌株IJ 的免疫原性最高，其含融合基因#’5#(#5 +.. ，证明该种融合基因的构建方式最 佳。这为利用 层蛋白 表面展示系统构建展示其它禽类病原体抗原的重组菌株以研制禽用热稳定性口服疫 H5 I3I 苗奠定了基础。 关键词：苏云金芽胞杆菌； 层表面展示；禽流感病毒 蛋白；热稳定性口服疫苗 H5