多环芳烃菲对微生物生态毒理研究、菲降解菌分离鉴定及其降解基因克隆和表达.pdf

多环芳烃菲对微生物生态毒理研究、菲降解菌的分离鉴定及降解 基因克隆与表达 中文 摘 要 aromatic hydrocarbon，队Hs)在环境中分布广泛，极易在环境 多环芳烃(Polycyclic 中累积并可通过食物链传递，对人类健康和生态环境具有很大危害性。菲囡具有独特的化学 结构，成为队Hs研究中的模式化合物，菲污染的研究不仅有利于污染环境中菲的去除，还 可为其它PAHs污染的防治提供有价值的资料。 本文全面探讨了菲污染对淹水稻田土壤的微生物生态毒性效应并分离到两株菲降解细 菌，对其进行了鉴定以及系统发育研究，同时进行了降解特性和降解基因克隆及表达方面的 研究，为建立有效的菲污染预警指标体系和菲降解微生物的有效利用提供有益的参考。 本研究所获主要结论如下： l、以杭州临平镇附近农田水稻土为材料，采用室内培养方法系统研究了不同程度的菲 污染对淹水稻田土壤可培养微生物种群以及酶活性动态变化过程的影响。研究结果表明，不 同浓度的菲对好氧细菌的生长和脲酶都具有刺激作用。并且刺激作用随菲浓度的升高而有所 加强；不同浓度的菲对真菌和脱氢酶则在整个培养过程中都具有毒性作用，特别在高浓度菲 处理土样中，这一表现更为明显；各浓度的菲都对放线菌、厌氧固氮菌和产甲烷细菌具有急 性毒性效应，并且100mg，l(g干土的浓度一直表现出对放线菌的毒性效应。在传统微生物污 染生态研究基础上，运用PcR．DGGE方法，对菲污染条件下稻田土壤真细菌种群的基因多 样性进行了初步研究。通过对菲处理后的淹水稻田土壤的DOGE图谱和多样性指数分析， 发现各处理间的土壤微生物多样性出现了一定的差异，并且菲浓度越高与对照土样的多样性 指数相似性越低。 2、从石油污染土壤中筛选分离到2株菲降解菌株，分别命名为zx4和E、，A17菌株。 01％含量分析，全细 通过细菌形态学观察，生理生化测试，碳源利用实验(Bjolog)，G+Cm 胞脂肪酸分析以及16srDNA和ITs序列同源性分析，证明两株菲降解细菌应属于鞘氨醇单 胞菌属细菌。其中菌株zx4被鉴定为少动鞘氨醇单胞菌的又一菌株，推测菌株E、A17应当 第一章前言 第一章前言 第一节多环芳烃菲的微生物降解综述 1．多环芳烃的累积和环境毒性 aromatic PAHs)是由两个或两个以上的苯环以线 hydrocarbon， 多环芳烃(PolycycIic 形排列、弯接或簇聚的方式而构成。队Hs在环境中分布广泛，由于其自身的疏水性及低水 溶性，能很快进入到沉积环境中。并且它们随着苯环数量增加，脂溶性越强，水溶性越低， 在环境中存在的时间越长，遗传毒性越高。PAHs极易在环境中累积并可通过食物链传递， 对人类健康和生态环境具有很大危害性(莫测辉等，2002；蔡全英等，2002：s∞ed甜口，．，1995； 我国也早把PAHs列入环境优先监测的污染物黑名单。 ：oo： ：$：：昂：：嘏 N-曲lⅫ●时 ：《冷?融： ：国：：捣： ：豳：：国： 粤磐璺澎 ：鼢。鹚? 蛳～妒。绱一越一 图卜116种优先处理的多环芳烃的结构和名称 nomenclaturesof16PAHsinEPA llst I·lSt兀lcturesand priority Fjg polIutant