羧甲基壳聚糖体外溶菌酶降解研究.pdfVIP

羧甲基壳聚糖体外溶菌酶降解的研究 陈浩凡12潘仕荣‘胡瑜 onthe of Chitosanwith Study BiodegradationCarboxymethyl i nVitro Lysozyme Chenhaofan’2 Pansirong‘Huyul 摘要：目的：研究不同取代羧甲基壳聚糖(CMC)的生物降解性。方法：通过体外酶解试验，用粘度测定法 降解；酶解反应程度与酶浓度咸线性关系；随着羧甲基壳聚糖取代度的增加，cMc的降解速度加快。结论：通 过控制取代度，可以得到不同生物降解要求的羧甲基壳聚糖。 关键词：羧甲基壳聚糖取代度生物降解 的生物医用材料”J。羧甲基壳聚糖(Carboxymethyl 保留了壳聚糖的优点，又极大地改善了水溶性，因而具有更广泛的用途，在众多甲壳素衍生物中，倍受关注。 理想的预防粘连的屏障介质必须为无炎性反应性，在腹膜再生的关键阶段能保持自身的稳定性，和过后又 能够被机体所吸收的“。’。羧甲基壳聚糖的生物降解性与医学性能必须匹配，即保证手术切口愈台后羧甲基壳聚 糖才发生降解。因此有必要对羧甲基壳聚糖的降解进行研究。除了甲壳质酶、壳聚糖酶的专一性降解作用外， 其他酶对壳聚糖类聚合物也有不同程度的降解作用”“。本文用溶菌酶来降解羧甲基壳聚糖，探讨CMC在不同 酶浓度下的催化特性以及羧甲基取代度及取代位置对CMC溶液降解的影响，得到结构与降解性能的关系，为 cMc在可降解防粘连材料、缓释控释药物载体等方面的应用提供理论依据。 一．实验部分 1仪器和材料 甲壳素和壳聚糖(脱乙酰度87 盐酸和氢氧化钠为分析纯，其它试剂为化学纯。 海伯奥生物科技有限公司，分子量14400，酶活力10000 U／mg)；乙酸、乙酸钠(广州化学试剂厂，分析纯)。 2方法 (1)不同取代羧甲基壳聚糖的制备与结构测定 采用不同的合成路线，通过控制反应条件(反应路线、反应时间、反应温度、碱的浓度和投料比等)制备 基壳聚糖的粘均分子量，采用胶体滴定测定羧甲基的取代度和取代位置，IR、1HNMR表征其化学结构‘8一，结 果见表1。 (2)酶浓度对MO-CMC-2降解程度的影响实验 1 羧甲基壳聚糖粘均分子量(M．)用粘度法测定”“”1，将试样溶解，所用溶剂是0 8029 0089 作者简介：1深圳武警边防匿院．广东深圳51 2中J一太学附属第一医院人工心研究室，广东广州51 146 缓冲液，使浓度约为1 方程为…1：【n】-7 U，mL的溶液。 取上述稀释后的MO-CMC-2溶液10mI，分别加入不同量的溶菌酶，使体系的酶浓度分别为0、25、50、 5 100、150U／mL，在25℃下反应0h，然后测定【n】，并按下列公式计算酶解反应程度(用降解百分率表示)。 降解百分率c％，=堕塑雯堕壁甏蓑毫纛云雾霎爹攀×·。。％t公式一， (3)溶菌酶降解不同取代羧甲基壳聚糖实验 分别取于25℃预热15min的10mLCMC和O min 管中，充分混匀后迅速置于25℃培养箱中，培养0、6、12、24、48、96min后取出，置于100C沸水中5 n，结果见表2，并按公式计算酶解 使溶菌酶失活。同法测定【n】并求出CMC降解不同时问后的粘均分子量M 反应速度。 =．结果 1．羧甲基壳聚糖的分