识别人体端粒DNA+G-四链体的染料结构设计与光谱研究.pdfVIP

籍：#袅?镕豢!!毒，盖螽：耋盆。喜 “凌：留{勰1” 识别人体端粒DNA昏四链体的染料结构设计及光谱研究 杨千帆，向俊峰，孙妹娜，唐亚林‘，周秋菊，杨舒，棘广智，闩文鹏 十目#{＆m{m￡*+ni1001∞ 摘要设计，一种新型菁染料MTc，通过其聚集状态的改变及单件荧光增强的程度，可以简单迅速的识 别出艘睦DNA与。目链体，“厦各种不同结构的G一目链体。另外．通过扫描激光菸聚焦i教镜．~rw对 组装在Au表面的口链DNA目oⅫ链体也能很好的定位和识别． 关t词G_口链体}菁染料}扫描共聚焦Ⅱ微镜 1 020l|02 中围分娄号f()644立雠标识码A 立童编号：1000m593{2。08)10 人体端粒末端的单链DNA能够形成G_四链体的结构。我们成功的用共聚焦激光扫描a截镜(cLSM)识别自T组装 研兜发现G_日链体具有扰乱端粒功能自抑制端粒酶的活性 在Au表面的混台结构。口链件和线性口链ImA．如图2 的能力-从Ⅲ成为一个措在的抗肿瘤靶点。目此识别。日链 肝示， 体与其他DNA二级结构(包括体外与体内)在认识G_日链体 的生理功能々抗肿瘤药物研发方Ⅲ都具有重要意义。但是， 目前关于Gu日链体结梅的识别方法主要还是以生物学方法 为主．利用荧光单丹f识*4G_日链休的报道根少。Ⅲ利用超 分子的独特聚集性质米识别{同nNA二级结构还没有被报 道过。车文通过分于设计，得到丁种具有鞍太平面共轭性 的菁染料分子(3，37删(3Lsulbpr。pm)4，5．4+，5‘mhrl行9 珊lⅫ一th—b【)cy删mmnh“龃…qlt，‘Ⅵc)．H用 来讽刺人体墙牲宁列DNA(TTA(m)·形成的G_四链悻结 自。 从吸收光谱上看，MⅡc在10—I．L_1礴醴缓冲溶藏 659 中土要是“}聚集体的形式存在，吸收峰位f 5m扯。 H晷lu嘲r肌吨H曲d岫释ⅡMIc瑚一吣咖 加^不同结构的DNA样品会导致M1℃聚集状态的T同改 hⅧ目《目tk—Ⅱh‰ 变t如图1所示，具有混台结构。目链体的DNA样品能使 染料J聚集体强烈解聚直i完垒解聚为单伴I而线性双链 矾A或具有反平行结柯G_目链体的DNA样品只能9量解 聚甚￥完全不能解聚染料j聚集体。这种整异明显的吸收光 酱空化提供T一种简便、快速识别不同结构DNA样品的方 莹． 人体端粒序列DNA样品不仅能不同程度的解聚絷料聚 下 集体，在与MTc分子的相互作用过程中还能不同程度的增 啦2a删蛔掣dMKⅫ删DN缸皿加剐恤 强m℃单悻黄光。田I和袅1显示了不同结树DNA对于 姗单体分子黄光强虚增加的不同程度．与吸收光谱结果 相一致，具有混合结构e口链体的DNA样品能极大的增强 mc单体荧光强度(约80～10。倍)I而线性双链DNA或具 DNA 有反平行结掏G_日链悴的删蛆样品只能有限的增强^仃c 单锋竞m强度(约10～30倍)．利用眦分子∞这种特性， t■目■：20。8_。}lD．■Ⅱ日≈：栅帅}10 292 光谱学与光谱分析 第28卷 TaMel ofthe Lin盯6ttiIlg chan辞ofMI℃Ⅱ啪om盯 哪i鹤i蚰inter坞ityagainst伽e咖l咖trati嘶我们的实验表明，菁染料MTc与不同结构DNA相互 DNA with fitted 作用，在吸收和荧光光谱上都有显著的区别。利用这种特 samples o“he Slope differentconfomlations line(×106) straight 性，可以将MTC用于不同结构DNA的识别和检测。这对进