SPA基因启动子的克隆及转录靶向活性分析.pdfVIP

【文章编号】1000-4718{2008)10-2002—06 SPA基因启动子的克隆及转录靶向活性分析 吏雪梅， 张惠兰△， 熊盛道， 甄国华， 熊维宁， 张珍祥，徐永健， 胡琼洁， 赵建平，倪望 (华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸科，卫生部重点呼吸病研究室。湖北武汉430030) 【摘要】 目的：克隆大鼠肺表面活性蛋白A(SPA)基因启动子并构建该启动子的荧光报告系统，探讨该启 动子的活性及转录靶向性，为进一步研究SPA基因的表达调控机制和探讨靶向性基因治疗奠定基础。方法：①从 胞和H441细胞，用双荧光素酶报告系统检测该质粒在两种细胞中的荧光素酶活性表达。结果：酶切及测序结果 均证实成功克隆了SPA基因启动子序列，并已将该序列正确插入到荧光素酶报告基因系列载体中。重组的pGL3 SPA基因启动子序列的荧光素酶基因报告系统，证实了它在高表达SPA蛋白的细胞中有较高的转录活性，为下一 步研究SPA基因功能及其转录调控以及探讨基因治疗的靶向性奠定了基础。 [关键词】基因，SPA；启动子；基因表达；转录靶向性；肺表面活性蛋白 【中图分类号]R363 【文献标识码】A ofSPA and ofits Cloning analysis genepromoter transcriptionaltargeting activity SHI Wei Xue—mei，ZHANGHui—lan，XIONGSheng—dao，ZHENGuo—hua，XIONG —ning，ZHANGZhen—xiang，XUYong—jJan，HUQiong—jie，ZHAOJian—ping，NI Wang ． (InstituteofRespiratoryDiseases，DepartmenlofRespiratoryDiseases，ro,墙iiHospitalAffiliated to蝌MedicalCollege， and HuazhongUniversityofScienceTechnology，Wuhan430030。China．E—ma／／：hu／／anz_76@163．com) clonethe andconslxuctitslueiferase of AIM,To SPA vectorSPA and协 [ABSTRACT] genepromoter report gene its SPA Was from which studytranscriptionaltargetingacti“t)r．METHODS：①ThegenesequenceacquiredGenBank，of the was tobioinformatics．Theresultsshowedthatthe ofSPA upstream region analyzedaccording upstream gene8equenP弛 about hasthefunctionof SPA was