不同刺激对小鼠B细胞表面IgD表达的影响.pdfVIP

维普资讯 ． {}号 动 物 学 研 究 l994，15 (3)：8l 86 CN 53—1040／Q ISSN ZoologicalRehash 不 同刺激对小 鼠B细胞表面 IgD表达 的影响 丛英姿 壬 {山东大学生物 系 济南250100) ’R3 —r一 摘要 本文通过细胞流式计 (FACS)技术，利用单克隆抗体抗 IgD[Ig(5a)72]研究 了膜表面 IgD(slgD)在新制备的小鼠B细胞上的表达。并通过用不 同的丝裂原刺激脾脏休止 B细胞，研 究了不周刺激对 B细胞 slgD 表达的调节，发现脾脏 B细胞形成两个主要细胞群，高浮力密度 小B细胞高度表达 sIgD，而低度表达 sIgD 的细胞主要是低浮力密度大 B细胞。无论用细菌脂 多糖 (LPS)或抗 IgM 和 白细胞舟素 6(IL 6)刺激脾脏休止 B细胞，均可诱导表 面 IgD 降低， 同时细胞大量增殖，细胞个俸增大，这些结果表 明，无论体 内或体外，B细胞活化后表面 IgD 的表达降低。 关键词 ，细撼 sM， 疲 势 ， r刺嗽 B细胞的发育过程 中，发生一系列的免疫球蛋 白基因的重fl~(Livant等，1986；Van Ness， 1982)，包括免疫球蛋 白重链 (IgH)可变区和恒定区基因的重排 。一旦前体细胞完成 了Ig基因重排，并在其表面表达 Ig，就进入了休止状态，以对外界抗原发生应答或几天 内死亡。在新生小 鼠，大部分 B细胞仅携带表面 IgM 。从 出生后 4至 6周起 ，大多数 B 细胞同时表达 IgM 和 IgD(Lawton等，1974)。这两种细胞群之间发育上紧密相关。用抗 一 IgM 处理新生小 鼠，发现 IgM一细胞是产生 IgG和 IgA 的细胞的前体，但 尚未确定这些 前体细胞是否只表达 sIgM 或同时表达 sIgM、sIgD。抗一IgD抗体无论在体内或在体外均 可激活 B细胞，使得它们对于蒯激抗体生成的细胞 因子具有更大的反应性，表 明 slgD在 B细胞的活化 中具有重要的作用。 本文运 用FACS技术研究了IgD在小鼠脾脏 B细胞表面的表达 。结果表 明，所有脾 畦 B细胞都表达 sIgD，休止 B细胞表面 IgD 的表达较高，B细胞活化后 IgD 的表达降 低。 l 材料和方法 1．1动物 BALB／C小 鼠，常规饲养。 1．2单克隆抗体 8C5单克隆抗一CD3由Coffman R博士(DNAX研究所，Palo，Alto，CA)提供} ·国家 自然科学基金费助项 目。部分实验在美 国Tufts大学完成 本文 1994年 1月 3日收到，同年 3月 13日修 回 维普资讯 82 动 物 学 研 究 I5卷 B7．6anti 由 Woodland R博士 (Massachusetts大学 医学 中心，Worehester，MA)提 供 ；rlL 6由 VanSnick(布鲁 塞尔)提 供 ；RL172．4(anti—CD4)，TiB2l1(anti—CD8)、 antiIgD [Ig(5a)7．21细胞株购 自ATCC (RockviUe，MD)。上述抗体 由本实验室用生物 素或异硫氰酸荧光素(FITC)所标记。 1．3细胞制备 脱颈杀死小鼠，取脾脏 ，制成单细胞悬液后，通过用 TrisNH CI溶液 (pH7．4)处理 而去除红细胞。通过以补体介导抗体杀伤法，用抗 CD3、抗一CD4和抗一CD8抗体和兔 ．