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实验六 平板划线分离菌种 一、目的要求 二、实验原理 三、材料器皿 四、实验步骤 五、注意事项 六、复习思考 一、目的要求 1、了解平板划线法分离菌种的基本原理 2、练习平板划线法分离菌种的基本操作，掌握无菌操作技术 二、实验原理 1、平板划线法是指把杂菌样品通过在平板表面划线稀释而获得单菌落的方法。 2、平板划线分离对细菌、酵母菌较为适宜，在菌种鉴定中需多次划线分离才能获得可靠菌种。 3、鉴别培养基：例如：伊红美蓝培养基 经典四区划线法 GB5749-2006 生活饮用水卫生标准 三、材料器皿 1、菌种：大肠埃希氏菌(Escherichia coli)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的混合培养斜面菌种。 2、培养基：伊红美蓝琼脂培养基。 3、器皿：无菌培养皿，水浴锅，接种环，培养箱等。 四、实验步骤 1、融化培养基 2、倒平板 3、作分区标志（操作熟练后此步骤可省略） 4、划线操作（挑取菌样→先划A区→划其余区） 5、恒温培养 6、挑单菌落 7、清洗培养皿 五、注意事项 1、隔天倒平板 2、琼脂含量高 3、巧用接种环 4、练后再实操 六、复习思考 1、用平板划线法进行纯种分离的原理是什么？有何优点？ 2、要防止平板被划破应采取哪些措施？ 3、为什么在划完A区后要将环上的残菌烧死？划后面几区时是否也要经过同样的处理？ * * GB4789.38-2012 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠埃希氏菌计数 第一法 大肠埃希氏菌MPN计数 *
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