猪流行性腹泻病毒引起仔猪腹泻的诊断.pdfVIP

． 10． 贵州畜牧兽医 2015年 第 39卷 第 1期 猪流行性腹泻病毒弓I起仔猪腹泻的诊断 许旭东 ，冯旭芳 ，毛黎红 ，周碧君 ·，文 明 ， ，王开功 (1．贵州大学动物科学学院，贵州 贵阳 550025；2．贵州大学动物疫病研究所 ，贵州 贵阳 550025； 3．贵州省动物疫病研究室，贵州 贵阳 550025) 摘要：为了对贵州省某猪场发生的仔猪腹泻疫情进行病原学诊断，采用细菌分离培养、PCR及 RT—PCR方法分别对采集 的病料进行了细菌、猪流行性腹泻病毒及其他3种病原检测。结果显示 ，猪流行性腹泻病毒检测样品中出现651bp目的条 带，其他几种病原检测均为阴性，细菌分离培养未见细菌生长。结果表明，此次仔猪腹泻疫情的主要病因为猪流行性腹泻病 毒感染 。 关键词：猪流行性腹泻病毒；仔猪腹泻；诊断 中图分类号：$858．28 文献标识码 ：A 文章编号：1007—1474(2015)01—0010—03 猪 流 行性 腹 泻 (porcineepidemicdiarrhea， 1．1．1 样品：4头呈现腹泻症状的死亡小猪 (2—10 PED)是 由猪流行性腹泻病毒 (porcineepidemicdi． 日龄)，剖检后无菌操作采集肠道、粪便及其他 内脏 arrheavirus，PEDV)引起猪的一种高度接触性肠道 器官样品进行实验室检测 。 传染病，主要特征为引起猪呕吐、腹泻和脱水 ，哺 1．1．2 试剂盒：猪圆环病毒2型检测试剂盒，购 自 乳仔猪、架子猪或育肥猪等各年龄段均可发病，但 北京世纪元亨公司；PrimeScriptTM OneStepRT— 哺乳仔猪发病和死亡最为严重 j。2011年 以来， PCRKitVer．2，购 自大连宝生物公司。 猪流行性腹泻在我 国猪群 中迅速传播 ，仔猪一旦 1．1．3 培养基：伊红美兰、麦康凯、鲜血琼脂及普通 感染发病 ，病死率可达 60％ ～100％，给养猪业带 琼脂等培养基，由实验室配制 。 来较大的经济损失 ]。 1．1．4 引物 ：根据 GenBank上登录的PEDVS基 2014年 1月，贵州省某规模猪场仔猪发生腹泻 因、TGEVS基因、PoRVVfy7基因保守序列各设计 疫情，仔猪在出生2d后出现呕吐，紧接着 出现水样 1对特异性引物 ，上游 PEDVP1：5’一T]CTGAGT— 腹泻，消瘦，最后因严重脱水死亡。对仔猪使用磺 CACGAACAGCCA一3’；下 游 PEDV P2：5’一 胺、四季青等药物治疗均无效，至4月已死亡仔猪 CATATGCAGCCTGCTCTGAA 一3’，扩 增 长 度 1000多头。对病死猪进行解剖，见肠系膜淋巴结充 651bp。上游TGEVP1：5’一GTGGTTTTGGTYRTA— 血，肾脏点状出血，肠透明充气，肠 内有黄色凝乳块， AATGC 一3’；下 游 TGEV P25’一CACTAAC— 肺瘀血，胃溃疡，其他脏器未见异常。现将诊断隋况 CAACGTGGARCTA一3’，扩增长度 859bp。上游 报道如下。 PoRV P1：5’一 GGCTTTAAAAGAGAGAAqqTC 一 1 材料与方法 3’；下游 PoRV P2：5’一GGTCACATCATACAGT— TCTAAC 一3’，扩增长度 1062bp。引物 由上海英