乙型肝炎病毒基因异质性与准种特点研究的临床意义.pdfVIP

·4· 乙型肝炎病毒基因异质性及准种特点研究的临床意义 成军 乙型肝炎病毒(瑚V)感染，不仅引起急性、慢性病毒性肝 广泛关注。我们的研究表明，在慢性HBV感染患者中，的确 炎。而且与肝纤维化、肝细胞癌(HOC)的发生和发展密切相存在准种现象，同时也得到了文献的证实。我们首先研究了4 关。数十年来。随着HBV抗原和抗体标志物检测技术的建立 两个慢性HBV感染者血清中HBVDNA序列，特别是相对保 及应用，血源性、基因工程疫苗的免疫预防接种，干扰素a 守的S基因区的核苷酸序列不均一性的特点。设计了S基因 (礤Na)以及核苷类似物如拉米夫定等抗HBV药物的临床应(包括前一S1、前一＆和S区)的特异性引物，以HBV慢性感 用，在—定程度上控制了HBV感染的进一步流行，同时，也改 染者血清提取物DNA为模板，以多聚酶链反应(P(浆)技术扩 增，获得了1 变了I--IBV感染分布的规律和流行模式。但是，}Ⅱjv感染的 400bp的DNA片段，将这种扩增的DNA片段尽 现患病人的治疗仍然是一个十分棘手的问题，而且离我们最 可能多地克隆到T载体中以实现克隆化。分别获得了29和 终控制I-tBV感染的流行还有相当的距离。原因是多方面的，28个克隆。当以EcoRI／XhoI进行限制性片段长度多态性 其中包括对于HBV的特性还没有全面而深刻的认识，如 (RHP)分析时，在每一例病人中至少发现5种以上的表现形 式，这种RFLP特点经核苷酸序列的测定得到证实。对于所 HBV基因的异质性(heterogmdty)与准种(qtmispecles)的特 ‘ 点等。 得到的克隆进行序列分析，结果表明每个克隆之间的序列不 1．基因型、血清型、准种的基本概念 完全一样，但同源性在98％以上，遗传学上高度相关。随后 对HBV其它的结构基因区如X基因、核心基因、逆转录酶区 病原微生物。无论其核酸成分是RNA还是DNA，在自身 复制过程中由于RNA聚合酶或逆转录酶缺乏严密的自我校 等以及调节基因区如SPl、SP2、CP、XP和增强子基因序列的 读功能，或同时在宿主免疫压力或抗微生物药物的选择压力 异质性进行研究，都证实了HBV在慢性感染个体中都是普遍 下，其核酸成分在少数位点上发生突变是一种十分常见的现 存在的，为慢性HBV感染者体内存在HBVDNA的准种特点 象。在长期与生存环境的相互作用过程中，早期来源于同一 提供了直接的证据。 祖先的病原微生物，因为这种突变的不断累积，就可能发展为 乙型肝炎病毒基因序列的异质性及准种有如下一些特 核酸成分差别很大的病原微生物群，以至于造成核酸序列的 点：第一，HBV基因序列的异质性和准种特点是慢性蛐V感 显著差别，最终逐渐形成不同的基因型(ga蛳)；如果某些染患者普遍存在的一种现象，而不是仅存在于个别患者的特 核酸序列位点的改变导致其编码产物抗原性的改变，就逐渐 点；第二，HBV基因序列的异质性和准种特点在啪V基因序 列的结梅基因区和词节基因区都是普遍存在的。在S、x、前 构成了微生物不同的血清型(serotype)。这就是病原微生物 基因型和血清型形成的基本过程。但是，对于感染的单一病 一C／C、P基因区都存在基因序列的异质性和准种的特点，而 原体的具体患者来说，在相对较短的时间内，病原微生物核酸 且在HBV基因的调节序列如启动子、增强子序列中都是存在 的突变则造成体内同时存有基因序列有微小差别的种群。种 的，这种特点贯穿于HBV整个基因组；第三。I-IBV基因序列 群的各个成员之间，其差别程度一般不会超过核苷酸总长度 的异质性与准种的特点，具有重要的生物学和临床意义。由 的2％～5％。这种差别不至于构成病原体不同的基因型或血 于HBV基因序列存在着异质性和准种的特点，产生具有反式 清型，但的确存在着基因序列的差别，这种现象就称为准种