丁胺卡那霉素抑制与解离假性血小板聚集作用研究.pdfVIP

丁胺卡那霉素抑制和解离假性血小板聚集作用研究 陈国强 祝忠良 张玉霞 沈 燕 梅梦寒 浙江省人民医院检验医学中心 310014 乙二胺四乙酸 EDTA 盐是全自动血细胞计数仪细胞计数的常用抗凝剂 它能有效地保持细胞形态和防止血 小板聚集 由多种原因引起 EDTA 依赖性血小板减少症近年来常见报道 虽然其临床发生率仅为 0.09% 0.21% 但是 这种假性低血小板会导致临床误诊 误治 因此 建立一种合适的方法来解决这种情况保证血小板计数的准 确性非常必要和有意义 文献报道通过在抗凝血中加入丁胺卡那霉素等抗凝聚剂 可成功制和解离因抗凝剂等所致 的假性血小板聚集 血小板得到准确计数又不影响细胞形态分析 现将结果报告如下 材料与方法 1 试剂和仪器 EDTA-K2 抗凝真空采血管由美国 BD 公司提供 丁胺卡那霉素由齐鲁制药有限公司生产 日 本sysmexXE-2100 血细胞分析仪及配套试剂和质控物 2 对象 80 例 其中 1 例为EDTA 依赖性假性血小板减少症 行EDTA-K 抗凝血作血液分析发现血小板计数 2 低于正常参考植 仪器提示血小板拟合曲线不正常和血小板聚集 结果与临床症状不符的患者 其末梢血涂片证实 血小板形态和数量正常 3 方法 手工法血小板计数用许汝氏法 其结果作为参考植 EDTA-K2 抗凝真空采血 2ml 在 XE-2100 血细 胞分析仪上测定血小板数 观察不同时点 10min 0.5h 1h 2h 4h 血小板数量的变化情况 并在各观察点分别 涂片观察血小板形态与分别 在EDTA-K 抗凝管中分别加入不同浓度丁胺卡那霉素 分别观察不同浓度下的血小板 2 变化情况 得出最佳抗凝聚浓度 将选出的最佳抗凝聚浓度丁胺卡那霉素于采血前和采血后分别加入抗凝管中 观 察抑制和解离血小板聚集能力 结果 1 不同浓度的丁胺卡那霉素对 EDTA-K2 抗凝血中血小板计数的影响 随着丁胺卡那霉素浓度下降其血小板计 数降低 图 1 血涂片也表明随着丁胺卡那霉素浓度下降血小板聚集现象明显增加 显示其抑制血小板聚集作用呈 明显的浓度依赖性 2 采血前 后分别加入丁胺卡那霉素对血小板的影响 采血前 1h 和采血后 15min 加入丁胺卡那霉素 浓度为 5mg/ml 血液 混匀 置室温 4h 血小板数量无明显差异 图2 血涂片中血小板很少见聚集 分布和形态基本正 常 3 80 例仪器报警血小板严重聚集或拟合曲线异常者加入丁胺卡那霉素 5mg/ml 前后血小板结果比较见表 1 从表 1 可见加入丁胺卡那霉素后由于其有效抑制和解离因抗凝剂等所致的假性血小板聚集两组间血小板结果差异明 显 P0.01 加入丁胺卡那霉素后血小板计数结果与手工法无显著差异 P 0.05 表 1 80 例仪器报血小板聚集及拟合曲线异常者加丁胺卡那霉素前后血小板结果比较 9 例数 血小板 ×10 /L T P 加丁胺卡那霉素前 136±6.7 80 12.87 0.01 加丁胺卡那霉素后 201±7.8 图1 不同浓度丁胺卡那霉素对血小板计数的影响 178 250 200