大鼠急性心肌缺血缺氧诱导因子(HIF-1α)的表达变化及法医学意义.pdfVIP

·中文论著摘要· 大鼠急性心肌缺血缺氧诱导因子 (HIF．1a)的表达变化及法医学意义 目的 在法医实际工作中，对心源性猝死的法医学鉴定一直是困扰法医学界的难题。 因为在心肌发生缺血、缺氧性损伤后，往往导致个体在短时间内死亡。此类心肌 缺血所致的心源性猝死案例，发病急骤，死亡迅速，通常缺乏明显的冠脉病变及 典型的心肌病理形态学所见。形态学改变的出现一般在心肌血供完全中断6小时 后才能观察到。对于这类无明显冠脉及心肌病变的案例往往通过法医工作者的主 观经验以及排除其他死因(如机械性窒息、急性中毒等)来鉴定。本研究通过建 立大鼠心肌缺血模型，观察大鼠心肌缺血早期HIF．1a的表达变化规律及法医学意 义。 实验材料与方法 后，将其随机分为7组(空白对照组、假手术组、缺血15分钟组、缺血30分钟组、 缺血1小时组、缺血3小时组、缺血6,b时组)。通过结扎左冠脉前降支，建立大鼠 急性心肌缺血模型，并用powerlab监测记录标准第1I导联大鼠心电改变情况。分 别于手术结扎左冠脉前降支后15分钟、30分钟、l小时、3小时、6小时将大鼠颈椎 脱位处死，取出大鼠心脏，去除结扎线以上心肌，将却血部位的心肌组织分为两 部分取材。一部分心肌放入4％多聚甲醛固定、制作蜡块，分别用于HE染色、免疫 组织化学染色、免疫荧光染色；另一部分心尖部心肌组织提取蛋白，用于 Plus 6．0图像分析系统进行分析，在 Western．blotj佥i贝0。免疫组化照片以Image．Pro x100光镜下每张切片随机取9个视野，检测累积光密度(imergratedopticaldensity， IOD)。Western 标阳性谱带，以平均光密度值(AverageOpticalDensity)分析各时间段条带的大 for 小和浓淡。采用SPSSl7．0Windows软件统计分析，应用方差分析进行数据统计 学处理，数据以均数士标准差(i士s)表示，组间比较用t检验，Po．05为差异有 统计学意义。 结果 心电监测结果显示，空白对照组及假手术组心电图未发生明显改变，实验组大 鼠心电图均显示ST段抬高。另有部分大鼠发生致死性心律失常。免疫组织化学染 色未见空白对照组及假手术组大鼠心肌有HIF．1a的阳性表达；缺血缺血15分钟 组可见心内膜下HIF．1a轻微表达；缺血30分钟组可见阳性着色在心内膜下逐渐 增强；缺血1h组可见阳性着色逐渐向心外膜侧扩展；缺血3h组可见缺血区域心 肌大量表达HIF．1a；缺血6小时组可见HIF．1a表达较3h组有所下降且阳性着色 呈滚动式向心外膜侧扩展。另外，实验组部分大鼠在结扎冠脉后发生室性心律失 常改变。通过免疫组织化学染色发现该部分大鼠左心室出现HIF．1a阳性表达的同 时，右心室也存在HIF．1a的阳性着色，无时间规律性且分布于右心室侧壁全层。 ；口◆己结论 1．空白对照组、假手术组大鼠心肌未发现HIF．1a的阳性表达。 2． 实验提示HIF．1a可以作为早期心肌缺血性心源性猝死(15分钟左右)的 客观鉴定指标。 3．发现提示HIF．1a可能对致死性心律失常性心源性猝死的鉴定有所帮助 关键词 法医病理学；心源性猝死；早期心肌缺血；HIF．1a；时间规律性； 2 ·英文论著摘要· The ofHIF-laafterAcute expression Myocardial Ischemiain RatsandForensic Application