复方茯苓甘草汤不同煎剂防治大鼠肺动脉高压的药效及毒性及研究.pdf

复方茯苓甘草汤不同煎剂对防治大鼠肺动脉高压的药效及毒 性研究 中文摘要 【目的】 通过建立常压缺氧性肺动脉高压动物模型，分别以肺动脉高压、肺血管形态 学、右心指数和动脉血气的改变为指标，将复方作为一个整体，采用不同的中药 制剂配方组成，将复方水煎液进行动物的药效学研究，进而确定哪个方案更具临 床疗效。然后对该方案进行动物毒性实验研究，探讨该复方的药物安全性，为进 一步的研究就是探讨中药的现代化运用成分研究，赋予传统的中医方药以现代的 科学内涵，为临床开发安全有效、质量可控的治疗阳哪的中药新药奠定基础。 【方法】 实验分不同中药制剂水煎液药效实验及复方茯苓甘草汤水煎液对SD大鼠的 毒性实验两个部分。 1．不同中药制剂水煎液药效实验：照薛全福等【62】的方法并略改动。采用SPF 级SD系雄性大鼠50只，体量200~2209，随机分组分为空白组、对照组、饮片 组、免煎组和再煎组，每组10只。大鼠按组别置于缺氧舱内，控制舱内氧浓度在 10±O．5％范围。每天缺氧8小时，连续缺氧2l天。空白组不缺氧，每天予生理 盐水4IIll灌胃，其余各组缺氧前每天予药液4ml灌胃。2l天后行右心导管法检测 大鼠平均肺动脉压(n姒P)，然后处死大鼠，取完整右下肺常规石蜡包埋切片， 行既及Wreig嘶弹性纤维染色，光镜下观察并计数肺小血管(15邺眯外径≤50岬) 别计算占肺小血管总数的百分比。利用图像分析系统测量肺中小型动脉相对中膜 厚度(岫及面积@MA)。并进行肺大疱面积比例的计算，每只大鼠选一相同肺 组织横向切片，每张切片用埘随Q、)l，in图像分析系统测定肺大疱总面积(SB)、 肺组织总面积(SL)，计算肺大疱总面积与肺组织总面积的比值(SB／SL)。计算 右心肥厚指数【R、，／(LV+S)】。心脏采血5ml，装入抗凝管中，冷藏箱保存，急送检 验进行动脉血气分析。检测相关指标，采用SPSSl3．O统计软件进行分析：计量资 料用(列E s)表示，多样本均数比较用单因素方差分析，先进行方差齐性检验， 统计学意义，比较不同中药组分制剂对防治肺动脉高压疗效结果。 2．复方茯苓甘草汤水煎液对SD大鼠的毒性实验： 2．1复方茯苓甘草汤水煎液不同浓度剂量分组： 急性毒性组——因在预实验中无法测出U)50，故进行了大鼠一天多次灌胃给 药的最大给药量的测定，结果最大给药量6009生药／kg，相当于人用剂量100倍， 人用剂量为lg生药／l(g，人体重以60kg计。 高剂量给药组——-：全方药物按生药材比例称量，以3609生药／l唱混悬液，相 当于人用剂量的60倍，浓缩成69生药／锄浓度，罐封冷藏备用。 中剂量给药组——全方药物按生药材比例称量，以1809生药／kg混悬液，相 当于人用剂量的30倍，浓缩成69生药，mJ浓度，罐封冷藏备用。 低剂量给药细——全方药物按生药材比例称量，以909生珧混悬液，相当 于人用剂量的15倍，浓缩成69生药／ml浓度，罐封冷藏备用。 随机分组分为空白组、急性毒性组、高剂量组、中剂量组和低剂量组，每组20 只。空白组不给药，每天予生理盐水自由饮用，急性毒性组一天5次灌胃，4n彬 次，其余三组每天按浓度限量配水饮用。分别于给药30天后及停药14天后随机 选取一半大鼠处死，完整剪下心脏、肝脏、肾脏、脾、肺、肾脏、子宫、睾丸、 卵巢、附睾、肾上腺，冰盐水洗净并经滤纸吸干后，电子天平称量重量，计算脏 器指数限·(L．卜s)。1】。各器官取部分组织用福尔马林固定，常规石蜡包埋切片， 行眦及W萌gcn弹性纤维染色，光镜下观察各组织形态结构是否异常。心脏采血 2IIll，装入抗凝管中，冷藏箱保存，急送血液学检测。心脏采血3叫，装入促凝管 中，冷藏箱保存，急送生化学检测。数据分析采用SPsSl3．0统计软件，计量资料 数据均采用均数±标准差(趸±s)表示，多组之间比较采用方差分析，以po．05 具有统计学意义。 【结果】 降低。右心肥厚，肺小动脉内皮细胞细胞破坏，中膜增厚，外膜炎性细胞浸润， 2 管壁细胞外基质异常沉积，管腔狭窄，无肌型及部分肌型动脉肌化，显示慢性缺 氧性肺动脉(P—岫高压大鼠模型成功建立。 BW相比较，差异无统计学意义(Po．05)。但三组相比较，C组最高，D组次 之，E组最低。C组、D组、这两组的肺小动脉内皮细胞细胞连续性破坏，中膜 平滑肌细胞