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2012;32(12) 南方医科大学学报（J South Med Univ ） ·1741 · 基础研究 + RNA 干扰抑制CD133表达对CD133 肝癌干细胞增殖和化疗敏 感性的影响 兰 曦，王 勇，曹 姝，邹冬玲，李 芳，李少林 重庆医科大学放射医学教研室，重庆 400016 + 摘要：目的 利用慢病毒介导的RNA 干扰技术下调CD133 HepG2 肝癌干细胞中CD133的表达，探讨其对肝癌干细胞增殖及化 + HepG2 细胞并检测分选前后CD133表达量，体外成球及体内成瘤实验 疗敏感性的影响。方法利用流式分选技术筛选CD133 鉴定其“干性”；随后以CD133 mRNA 编码序列为干扰靶点，采用慢病毒介导的shRNA 转染CD133+ 细胞。应用RT-PCR 和 Western Blot 检测CD133 mRNA 及蛋白表达，克隆形成实验检测转染前后细胞增殖情况，CCK-8法和流式细胞仪检测在化疗药 物顺铂作用下转染前后细胞的生长抑制率及凋亡情况。结果分选前后CD133表达率分别为（3.36± 1.80）% ，（88.74±3.19）% ； + - CD133 细胞相对于CD133细胞有更强的体外成球和体内成瘤能力；转染CD133 shRNA后的细胞CD133 mRNA 表达明显受到 抑制（P0.05），蛋白表达水平降低，增殖能力显著下降（P0.01）。顺铂对转染CD133 shRNA后细胞生长抑制作用明显提高（P +肝癌干细胞CD133基 0.01），且其在顺铂作用下的凋亡率也显著增加（P0.05）。结论慢病毒介导的shRNA 能显著下调CD133 因的表达，抑制其增殖并提高其对顺铂的敏感性。 +肝癌干细胞；RNA 干扰；顺铂 关键词：CD133；CD133 中图分类号：R735.7 文献标志码：A 文章编号：1673-4254（2012）12-1741-07 doi: 10.3969/j.issn. 1673-4254.2012.12.013 Lentivirus-mediated RNA interference of CD133 inhibits the proliferation of CD133+ liver cancer stem cells and increases their cisplatin chemosensitivity LAN Xi, WANG Yong, CAO Shu, ZOU Dongling, LI Fang, LI Shaolin Department of Radiology, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China Abstract: Objective To study the effects of CD133 suppression by lentivirus-mediated RNA interference (RNAi) on the proliferation and chemosensitivity of CD133 + cancer stem cells (CSCs) sorted from HepG2 cell line. Methods CD133 + and CD133- cells were sorted from HepG2 cell line by flow cytometry, and the expressio