高效液相-四极杆飞行时间串联质谱分析黄蜀葵花中黄酮醇类化合物.pdfVIP

第37卷 分析化学(FENX!HUAXUE)研究报告 第2期 Chinese of 227—231 2009年2月 JournalAnalyticalChemistry 高效液相一四极杆飞行时间串联质谱 分析黄蜀葵花中黄酮醇类化合物 池玉梅“ 朱华云1 居羚1 张瑜1 沈小宁2 华小懿1 聂芬1 1(南京中医药大学，南京210029)2(江苏苏中药业集团股份有限公司，姜堰225500) 摘要以中药材黄蜀葵花为分析对象，采用高效液相．电喷雾／四极杆．飞行时间串联质潜，识别中药中黄酮 醇类化合物。通过解析紫外光谱和二级质谱，识别了17个黄酮醇糖苷和2个黄酮醇苷元，用对照品对照及分 析酸水解液的方法进行了验证；并探讨了黄酮醇类化合物的电喷雾／串联质谱(ESI／MS／MS)的裂解方式；在 此分析基础上，研究了HPLC指纹图谱和多指标含量测定方法，方法学考察结果表明符合测定要求；采用金丝 桃苷、杨梅素和槲皮素作参照，以折算分子量的方法计算相对含量，扩展中药质量控制多指标化的范畴。 关键词 液相色谱．质谱联用，黄蜀葵花，黄酮醇，指纹图谱 1 引 言 黄酮类化合物是广泛存在于自然界的一大类化合物，常以游离态或糖苷形式存在，具有多方面生物 活性。黄酮醇类化合物是其中一类，其结构研究较为成熟。1’2|，但其质谱裂解规律在液相色谱一质谱联用 子，四极杆．飞行时间串联质谱(Q．TOF．MS／MS)通过对选择离子加能量使化合物裂解。裂解方式与电 子轰击质谱(EI．MS)不完全相同，同时因同分异构体的存在，使LC—MS在识别化合物时受到一定限制， 近年陆续有一些应用高效液相色谱．串联质谱(HPLC．MS／MS)分析成分、解析结构的报道_3曲J。 黄蜀葵花是锦葵科秋葵属植物黄蜀葵[Abelmoschus 柱)，主要成分为黄酮醇类化合物。7。，有多个同分异构体存在，目前尚未见有应用LC．MS技术对此进行 MS／ 系统分析的报道。本实验采用高效液相．电喷雾／四极杆-飞行时间串联质谱(HPLC—ESI／Q-TOF MS)对其黄酮醇类化合物，探究黄酮类化合物的裂解规律。 黄蜀葵花具有较强的生物活性，显著的临床疗效，但尚未收载于《中国药典》。本研究获得了黄蜀 葵的HPLC指纹图谱，为黄蜀葵资源的开发和质量评价提供研究基础。 2 实验部分 2．1仪器与试药 2695HPLC micro质谱仪(美国Waters公司)，配ESI源；Alliance HPLC—MS／MS联用系统：Q．TOF (美国Waters公司)，配Waters996 HPLC(美国Waters公司)，配 PDA检测器；工作站：Masslynx4．1。515 水(高纯水)，黄蜀葵花(采自镇江南山、泰州兴化市和泰州姜堰市，经南京中医药大学药学院谈献和教 授鉴定为黄蜀葵花的花冠和仡萼)。 2．2液质联用分析方法 mm×4．6 2．2．1色谱条件色谱柱：DiamonsilC．。柱(200 mm，5Ixm)；流动相：乙Jl青-o．5％甲酸；梯度 洗脱，流速：1ml_／min；柱温：30℃；柱后分流，分流比：1：50；PDA记录205～400nm紫外光谱。 2．2．2质谱条件负离子模式检测；检测范围：m／z100—1000；毛细管电压：2800V；样品孑L电压： 20 V；MCP检测电压：2100V；喷雾气流量：50L／h；脱溶剂气流量：350L／h；脱溶剂温度：300．0℃； 离子源温度：100．0℃；碰撞能量：25eV。 2008-07-20收稿；2008-09-11接受 ·E-mail：ymchii@sina．corn 万方数据万方数据 228