SCID鼠人源化及视网膜母细胞瘤模型的建立.pdfVIP

558 Chin J Hemorh .2005;15(4) SCID 鼠人源化及视网膜母细胞瘤模型的建立 张 积，徐国旭，周剑影，段莹莹，戴 宏 （苏州大学附属第二医院,江苏苏州 215004） 摘要：目的　进行SCID鼠的人源化并建立人化SCID鼠视网膜母细胞瘤模型。方法 SCID鼠腹腔注射人脐带血单个 核细胞 （CBMNC）生理盐水悬液。两周后割尾采血，检测其IgG水平。将10只人化的SCID鼠混分为两组，分别于腹股沟皮 6 7 下注入视网膜母细胞瘤细胞株 （SoRb-70），浓度分别为2×10，2×10，然后对肿瘤的发生率及瘤体大小连续观察，并 作统计学分析，最后做病理解剖及组织切片观察。结果 该实验经腹腔注射移植入SCID小鼠体内的CBMNC可在小鼠体 内存活并大量增殖。移植后2～4周，SCID小鼠血清中即可检测到人免疫球蛋白。视网膜母细胞瘤细胞以两个梯度接种人化 SCID鼠10只，观察8周，10只SCID小鼠7只致瘤。结论 该模型的建立方法科学合理，在一定程度上可模拟人眼视网 膜母细胞瘤的生物学行为，为进一步研究其发生发展机制及免疫治疗提供了一种模型。 关键词：视网膜母细胞瘤；严重联合免疫缺陷鼠；人源化；人脐带血单个核细胞 中图法分类号：R739.7文献标识码：A 文章编号：1009-991X（2005）04-0558-02 视网膜母细胞瘤（retinoblastoma, RB）是儿童 1.4 鼠的人源化SCID：取人脐带血40mL,用Hanks 眼部最常见的恶性肿瘤之一，致残率高，死亡率高 (pH7.2~7.5)将其倍比稀释，用人淋巴细胞分离液分 [1] ，研究这一肿瘤课题的前提是建立有效的具有人 离得到人脐带血单个核细胞(CBMNC)生理盐水悬液, 体免疫环境的实验动物模型。SCID鼠，全称为联 7 调整浓度为4.0×10/mL，分别取0.5mL经腹腔途 合免疫缺陷鼠（severe combined immunodeficiency 径转输入SCID小鼠10只,对照组注射相同体积生理 ［2］ mice）是1983年由Bosma等 培育出的一株重症 盐水。分别于人脐带血转输后2周起每周用割尾法 联合免疫缺陷近交系小鼠。因其抗原受体基因重组 采血，用BN—100全自动特定蛋白分析仪(Behring 异常，T、B淋巴细胞不能发育成熟，机体的体液 Nephlometer100 Analyzer)检测其IgG水平。 和细胞免疫功能均缺陷，难检测到免疫球蛋白的分 1.5致瘤性实验：将10只6~8周龄人源化SCID鼠 泌,对异源移植物不产生任何排斥反应。我们应用 随机分成A、B两组。常规传代培养的视网膜母细 SCID小鼠的上述特征,在重建人免疫功能的基础上, 6 7 胞瘤细胞株(SORb-70)，以2×10/mL、2×10/mL 进行了人视网膜母细胞瘤模型建立的初步研究。 两个梯度，每只0.5mL，分别接种于A、B两组人 源化处理一周后的SCID小鼠的腹股沟皮下。每天观 1 材料与方法 察肿瘤生长，从触及肿瘤开始，记录潜伏期，然 后，每2天于剪毛后，以游标卡尺测量肿瘤的长轴 1.1动物：SCID小鼠(6~8周龄，雌，雄性),中科 (a)及短轴(b)，根据下列公式计算肿瘤体积，绘制肿 院上海实验动物中心。SCID小鼠在SPF级动物饲养 2 瘤生长曲线: V＝(1/2)ab，