海洋微生物中新的细胞周期抑制剂与细胞凋亡诱导剂的研究.pdfVIP

果有待发表)。 通过5mmol／L乳糖诱导，并进一步利用金属螯合层析技术从破碎菌体的上清夜中获得它们的重组表达产 物，通过RP—HPLC方法鉴定的纯度均大于95％。利用实验室现有的药物筛选平台研究了上述3种重组产 物的抗肿瘤、抗菌、抗肝炎以及抗纤维化生物活性，发现上述3种重组产物体外均具有明显的抑制肺癌 殖活性：利用CCl4致急性肝损伤小鼠模型研究了3种重组产物的保肝护肝作用，发现其中的sHSA具有 一步的研究工作正在进行中。 海洋微生物中新的细胞周期抑制剂和细胞凋亡诱导剂的研究 卜顾谦群k2+崔承彬1朱伟明1朱天骄3蔡兵3张冬云1方玉春1刘红兵1管华诗 (1教育部海洋药物重点实验室，山东省海洋药物重点实验室，中国海洋大学海洋药物研究所，青岛266003； 2军事医学科学院毒物药物研究所北京100850：3天津生物医药研究所，天津300384) 海洋微生物处于低温、高压、寡营养的特殊环境，生物多样性远远超过陆地生物，其许多重要次级 代谢产物是陆地生物所没有的，因此，是寻找和发现新药先导化合物的重要资源…。本实验室近年采用 细胞周期抑制和细胞凋亡诱导筛选模型馆1，开展了从海洋微生物中寻找新的细胞周期抑制剂和细胞凋亡 诱导剂等抗癌先导化合物的研究工作。从青岛胶州湾海域的海泥、海水及动植物样品中分离纯化了2000 余株微生物菌株，对其发酵产物进行抗肿瘤活性筛选，结果发现12株放线菌、6株真菌发酵物具有显著 的细胞周期抑制和细胞凋亡诱导等活性，为此对这些活性菌株的发酵产物中抗癌活性成分进行了研究。 首先对活性菌株的发酵物进行抗肿瘤活性初筛和活性产物化学性质的稳定性实验、溶剂萃取实验及 活性菌株生长特征考察后，进行发酵培养生产菌，制备大量发酵物，同时根据预试验活性测试结果采用 不同溶剂对发酵物进行萃取获得发酵物的活性部位；利用小鼠乳腺癌温敏型tsFT210细胞，以流式细胞 术检测结果为分离向导，对发酵物的活性部位采用Si02，Sephadex 法，跟踪分离活性成分：利用理化性质及IDNMR，2DNMR等波谱方法鉴定了化合物化学结构，用流式细胞 术及SRB法初步评价了活性化合物的抗癌活性。 Aand A。分别采用流式细胞术和 terrelactam，terrelactoneB，flavorectulactone，albogritone terreusThom的代 周期抑制、诱导细胞凋亡及细胞增殖抑制作用。实验结果表明，来源于Aspergillus ·40· 性，其MIC值分别为0．078 B，可显著抑制tsFT210， 和细胞坏死活性。来源于放线菌Streptomycinealbogriseolus的Albogritone F p 分别为1．56∥g／mL，0．78／mg／mL和0。39g／mL；发挥细胞凋亡诱导作用的MIC值分别为6．25∥g／mL’ 3．13口g／mL和0．39∥g／mL。来源于放线菌Streptomycesflavorectus放线菌素类化合物1在1．0ug／mL 浓度时，对tsFT210细胞具有显著的细胞周期抑制作用，将细胞周期抑制在Go／G。期。 本文利用tsFT210细胞的流式细胞术筛选模型，采用跟踪活性分离纯化活性物质的研究模式，从海 洋微生物代谢产物中分离得到了系列具有显著细胞周期抑制和细胞凋亡诱导活性的化合物。通过对活性 化合物的结构阐明、鉴定及初步活性评价，结果获得结构新颖强抗肿瘤活性的化合物，对其抗肿瘤生物 学评价有待进一步深入研究，从获得化合物的结构类型以及本文相关活性研究结果可以看出，海洋来源 微生物的次生产物确为寻找抗癌新药先导化合物的良好资源。 致谢 日本理化学研究所长田裕之博士提供tsFT210细胞．本研究得到国家自然科学基金项目 金资助． 参考文献(略) 几种海洋生物活性多肽的抗肿瘤作用研究 沈先荣1，缪辉南‘，贾福星1．蒋定文1，毕丽娜2，储智勇1，李水军2，祝晓辉2 (1海军医学研究所，上海200433：2上海澳博海洋生物技术开发有限公司，上海200433