基于T细胞受体基因地血液肿瘤免疫治疗研究.pdfVIP

原激发免疫反应后可以产生抗肿瘤作用。但是Ig上的抗原决定簇的确切位置一直存在争议，许多 学者曾认为抗原主要来源于Ig可变区上的CDR区。近年Trojan等和我们的研究都表明，免疫球蛋 白可变区的主要抗原决定簇一抗原肽(T细胞表位)位于框架区，用这些抗原肽刺激HLA相合的淋 巴瘤以及正常人的淋巴细胞，能产生肽特异性的CD8+T细胞。并能杀伤淋巴瘤细胞。最近Lou等应 用胚系B细胞免疫球蛋白可变区上的抗原肽，也诱发出了体内特异性的抗肿瘤免疫反应。 在B细胞发育的过程中，每个克隆特有的免疫球蛋白可变区要经历基因重排，已知有60到70 个Ig重链可变区(IgHV)基因片段参与了重排，重排时这些片段随机组合，构成了可变区的多样性。 根据基因重排序列的同源性特征，可将体内的B细胞群分为HVl一HV7个基因家族。 位)，而且这些抗原肽又被证实能够引起特异性的免疫反应，那么我们就有可能不必为每个病人制备 疫苗，而按照基因家族的分类进行B淋巴细胞肿瘤的免疫治疗。根据这种想法，我们检测分析了数 百倒B淋巴细胞肿瘤病人的tgHV重摊基因序列上的抗原肽分布，同时与正常的胚系IgHV比较，首 胞表位(12种基因家族特异性抗原肽)。利用体外CD8+T细胞刺激扩增体系，这些抗原肽可以激活 胞与抗原呈递细胞共培养，特异性CD8+T细胞可以克隆性大量增殖，而且这些CD8+T细胞细胞可 以杀伤或者调控属于同一IgHv家族的淋巴瘤细胞。此外，我们还构建了以IgHV基因家族的T细 胞表位为核心的表达载体做为DNA疫苗，免疫小鼠后可以观察到特异性针对同一IgHV家族淋巴 瘤的免疫反应。我们的实验表明，以IgHV基因家族的T细胞表位抗原肽为靶位，将B细胞肿瘤按 照lgHV家族的分类进行免疫治疗的方法是有可行性的。 在实验中我们进一步注意到，同一IgHV基因家族的肿瘤细胞和正常B细胞共享同样的T细胞 表位，特异性CD8+T细胞也可以通过B细胞表面的IgHV上的T细胞表位识别某些基因家族的正 常的B细胞。由此推测，很可能机体内天然存在一群通过不同T细胞表位控制B细胞增殖的调节 性T淋巴细胞(CD8+Tr)，这些T细胞调节和控制具有不同功能的B淋巴细胞克隆群。由于我们已 经找到了供CD8+细胞识别的IgHV框架区上的T细胞表位，用这种抗原肽刺激可以获得大量的特 异性∞8+T细胞，因此有机会了解T，B淋巴细胞之间是如何通过抗原肽(T细胞表位)。TCR和 Blood MononHdear 特异性T细胞的增殖情况；细胞因子释放实验和细胞毒杀伤实验验证CD8+T细胞功能；应用基因 谱型图分析这些CD8+T的T细胞受体(T—ceH 制性和肽特异性。 这一工作的发展前景是，有可能通过控制某些淋巴细胞克隆增殖的方式对各种自身免疫性疾病 或者肿瘤进行新型的免疫治疗。 08． 基于T细胞受体基因的血液肿瘤免疫治疗研究 李扬秋 暨南大学医学院血液病研究所 (广州510632) 获得性抗原特异免疫治疗是目前肿瘤治疗中十分吸引人的领域，首先它不因病人自身的免疫活 8 性而影响疗效，而且输注特异性淋巴细胞可以有效靶向肿瘤相关抗原，后者由于免疫原性低不能引 起有效的自体抗肿瘤T细胞免疫应答。由于分离和体外扩增抗原特异淋巴细胞的限制，传统的获得 性免疫治疗仅仅限于某些特定研究中心的少数病人的应用。借助对抗原特异淋巴细胞的T细胞受 体(TCR)基因分析结果，将TCR作为基因治疗分子而实施新的非传统性的获得性抗原特异免疫治 疗正在研究中。 1抗原特异T细胞的确定和T细胞受体基因分析 获得抗原特异CTL是实施靶向过继性免疫治疗的关键，它可由病人体内肿瘤抗原刺激而产生， 也可经体外特定抗原诱导而获得，后者包括自体和异基因抗原特异CTL。体外诱导特异CTL的血 液肿瘤抗原包括采用整个肿瘤细胞、肿瘤细胞凋亡产物、人工合成的多肽(融合基因、癌基因产物等) 和独特型抗原等。利用肿瘤细胞或肿瘤细胞凋亡产物等诱导的CTL，由于存在多种肿瘤抗原或多个 肿瘤抗原决定簇等情况，往往出现1个以上的TCR v13亚家族的T细胞扩增。越来越多的研究应用 针对某一癌基因产物、融合基因产物或突变基因产物等等，而设计的人工合成}ⅡA限制性多