Aβ25-35联合D-半乳糖诱导老年性痴呆复合模型建立及中药干预与研究.pdf

A1825-35联合D一半乳糖诱导老年性痴呆复合模型的 建立及中药干预研究 硕士研究生：胡利 指导教师：吴正治教授 摘要 背景 阿尔茨海默病(Alzheimer’Sdisease，AD)又称早老性痴呆，是一种病因未 明的中枢神经系统退行性病变。该病以记忆力减退、认知功能障碍为特征。由于 病因复杂，发病机制不明，临床尚无有效治疗方法。随着人均寿命的延长，人口 老龄化发展，痴呆已经成为发达国家继心脏病、癌症和脑卒中之后第四位死因。 痴呆病人晚期丧失劳动能力，生活不能自理，心理能力急剧下降，通常在诊断后 3-9年内死于感染及其它系统疾病，给家庭和社会带来沉重的经济负担。作为痴 呆最常见类型的阿尔茨海默病，因其发病年龄较早(可早至40岁)，也称为早老 性痴呆，已经成为全球范围的世纪性难题。 AD特征性病理改变是p．淀粉样蛋白沉积形成的老年斑(senileplaque)、tau 蛋白异常磷酸化聚集形成神经原纤维缠结(neurofibrillarytangles)以及区域选择 性神经元死亡。近年来，逐渐积累的证据显示低聚物形式的Ap和tau可能是阿 尔茨海默病主要的罪魁祸首。由于脑内特定区域的淀粉样斑块与认知损害的程度 相关，且AD的蓄积是阿尔茨海默病的早期事件。有人认为当Ap的产生与清除 之间出现不平衡，加上肽段间的自我聚集作用，导致Ap开始蓄积。这种现象超 过一定限度，可能是AD的启动因子。支持这种观点者称之为淀粉样蛋白级联假 cascade hypothesis”)。不断积累的证据也显示，Ap具有神经毒性。 说(amyloid 利用AB脑室内或者海马内注射可以复制阿尔茨海默病动物模型。可致大鼠学习 记忆障碍，海马胆碱乙酰转移酶(CHAT)活性降低等。该类模型适用于研究A13 聚集或沉积在AD发病中的作用机制，并可作为评价药物对AD治疗作用的模 中文摘要 型。 目前已经用于临床治疗阿尔茨海默病的药物主要是胆碱酯酶抑制剂，正在进 行研究的还有抗Ap的单克隆抗体、抵抗tau氧化和聚集作用的小分子试剂以及 脑源性神经营养因子(brain．derivedneurotrophicfactor,BDNF)替代疗法等。同时因 为中药的成分天然，作用靶点多，对解决病因复杂的疾病有独特优势，相关实验 研究及临床应用逐渐受到重视。 中医传统理论认为，情志所伤、所愿不遂、肝气郁滞是本病的重要病因和基 本病机。现代临床医学研究表明，抑郁发生在老年性痴呆的各个阶段，AD患者 最常见的行为异常是表情淡漠、情感低落、焦虑不安、易激惹等情绪相关症状。 因此，AD的中医病理属性当属肝气郁滞。同时，中医现代研究表明，肝郁证的 主要病理基础在大脑高级中枢。 内质网是重要的细胞器之一，蛋白质合成和修饰的场所。为保持内环境的稳 态，内质网会将错误折叠的分子跨膜转运到细胞浆中降解。这种机制称为内质网 相关性蛋白降解机制。体内外研究证明，内质网应激是AD发病机制之一。 基于内质网是细胞内精密的质量控制系统，在调控和维持细胞内环境稳定中 发挥极其重要的作用，其形态结构、生理作用与功能状态均具有疏通的特点，且 以调和畅达为至关紧要，与中医肝藏疏泄、调达的生理特性十分吻合，因此我们 认为，内质网的结构和功能是肝主疏泄的亚细胞生理基础。基于此，导师吴正治 教授结合传统理论与现代分子机制研究进展，提出老年性痴呆“肝气郁滞一内质 网应激关联”中西医结合病理假说，该假说的核心观点是：肝气郁滞是老年性痴 呆的基本病机，内质网应激为本病肝气郁滞的亚细胞病理基础，疏肝解郁可以缓 解和拮抗老年性痴呆内质网应激。 目的 建立A1325-35与D一半乳糖复合老年性痴呆模型；观察疏肝解郁代表方剂柴 胡疏肝散、补肝益髓巾药楮实子对A1325-35与D一半乳糖复合老年性痴呆模型大 鼠空间学习记忆能力及病理学改变的干预作用；探讨AD内质网应激及细胞凋亡 的相关发病机制，验证肝气郁滞一内质网应激关联新假说。 硕士学位论文 方法 本研究通过双侧海马内脑立体定向注射Ap25—35联合长期皮下注射D一半乳 糖的方法建立AD大鼠模型。将大鼠随机分为5组