诺氟沙星和牛血清蛋白偶联物制备的研究.pdfVIP

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第26卷增刊 分析试验室 V01.26.Suppl. Chinese 2007—10 2007年lO月 Journal of,如aalysis[,a}mratory 诺氟沙星与牛血清蛋白偶联物制备的研究 余宇燕鲁,张繁 (福建中医学院药学系,福州350108) 摘要:将诺氟沙星半抗原与载体蛋白质以碳二亚胺法偶联,合成了诺氟沙星. 牛血清白蛋白(NFLX.BSA)完全抗原。经紫外光谱测定,每分子牛血清蛋白连接 的诺氟沙星分子数为1.6个。结果表明牛血清蛋白和诺氟沙星分子问有较强的 结合作用。该偶联物可作为ELISA法测试诺氟沙星时所需的抗原,用于生物免 疫分析。 关键词:诺氟沙星;牛血清蛋白;结合比;紫外光谱 1.2实验方法 诺氟沙星(Noriloxacin)是一种新的氟喹诺酮类 抗菌素,具有广谱性和强烈的抑菌作用,已广泛 1.2.1诺氟沙星与牛血清白蛋白(BSA)偶联物的 应用于临床n]。其分子结构中含有3.羧基4氧一7.制备先将诺氟沙星粗品提纯,精密称取诺氟沙 哌嗪基喹诺酮环式结构。测定诺氟沙星在食品中 星纯品28.3嘴、羟基琥珀酰亚胺40.9mg、二环乙 残留的方法大多采用色谱法[2]。但是,该法对测定 基碳二亚胺109.7 mL二甲基甲酰胺 mg溶于16.0 样品的前处理不仅复杂,而且重复性较差,加之 中,搅拌16h,得到诺氟沙星反应液。精密称取牛 o 仪器昂贵而难以普及。本文以改良碳二亚胺法b 血清白蛋白(BSA)100.6 mg溶解于20札PBS 将小分子的诺氟沙星与大分子牛血清白蛋白进行 (0.01 7.4)中,然后将上述反应液滴加 mol/L,pH 偶联,再用紫外分光光度法来测定已纯化的偶联 到此BSA溶液,在4℃下搅拌8h后,对PBS透析 物的结合比,旨在合成用于ELISA法测定诺氟沙 2天半,离一6(3000转)50rain,取上清液,密封冰 星时所需的抗原,以建立快速、灵敏、特异性检测 箱冷藏保存。 诺氟沙星残留的方法,为有机药物残留分析领域 1.2.2蛋白质含量测定取上述溶液3mL定容 提供了一种强有力的工具HJ。 nm 至10mL,置于紫外分光光度计下,分别于280 1材料与方法 和260 nln处测其吸光度A。 1.1仪器与试剂 1.2.3偶联物性质的鉴定分别取牛血清蛋白溶 TU.1800spc紫外可见分光光度计(北京普析通 液的PBS溶液,诺氟沙星的PBS溶液,牛血清蛋

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