尾加压素Ⅱ和血管紧张素Ⅱ对血管收缩的协同作用及其信号机制的的研究.pdfVIP

博卜学位论文 尾加斥索11和血管紧张素II对咖管收缩的协同作用及苴信号机制的研究 摘 要 lI，U 尾加压素II(urotensin11)最早是从硬骨鱼脊髓尾部分离出来的神 经环肽，是迄今为止所知的最强的收缩血管的活性物质。Uu对血管的作用有解 剖学差异和种属依赖性，并且在不同的生理病理状态下对血管的作用不一致。在 心血管疾病中，如充血性心力衰竭，心肌梗塞，高血压，动脉粥样硬化等疾病中， 血浆及局部组织中UII含量升高，并且其它的一些生物活性物质，如血管紧张 II，Ang 素ll(angiotensin (catecholamines)含量也升高，说明UII和这些物质在疾病的发生发展中可能 有相关性。目前已有研究报道Ull和oLDL、serotonin对平滑肌细胞的增殖具有 协同作用，可以加速高血压或高脂血症病人粥样斑块的产生，加速疾病的发展。 所以研究UII与其它生物活性物质的相互作用，阐明相互作用的机制，对于进 一步揭示UII对心血管疾病的作用机制及治疗心血管疾病新药开发与研究都有 重要的意义。 本研究采用体外张力测定等方法，观察U II对血管收缩的协同 II和Ang 作用。我们采用低剂量不引起明显的血管收缩的U II观察两者对大鼠 II和Ang 胸主动脉(去除内皮)的协同作用，并且探讨协同作用的机制。结果我们发现2 nM、3 nM的UII对血管的收缩有协同作用，可以被GPRl4阻 nM的AngII和1 亚型，磷酸化的MLC和磷酸化的PKC底物含量与对照组相比升高，而单独加 入同等剂量的uII和Ang II(10 用。单独加入高剂量的U riM)可以引起血管明显的收缩，而且可以激活 ll缩血管的作用，并且在UII PKC阻断剂chelerythrilie阻断，说明PKC参与了u 缩血管的不同阶段，是不同的PKC亚型起作用的。 11收缩血管中的作用，我们用钙离子阻断剂 为了进一步探讨PKC在U II对血管的 uIl对于17周龄自发性高血压大鼠(SHR，内皮破坏)主动脉的收缩作用强于 II在不同的病理状态下对血管的收 对照组Wistar-Kyoto(WKY)大鼠，说明U 缩反应不同，具体机制有待于进一步研究。另外，我们还在人和大鼠的平滑肌细 胞上观察到UII对细胞也有收缩作用，PKC通路也参与了细胞的收缩反应。 由于UII在心血管疾病中有重要作用，为了观察UII对心脏的作用，我们用 免疫沉淀方法证实UII受体GPRl4(现已被命名为UT受体)蛋白主要存在左 博十学位论文 尾加斥索II和血管紧张素1I对血管收缩的协州作用及萁信号机制的研究 心室，为UII对心脏的作用提供了直接的证据。另外，我们还观察到UlI不能 引起心肌细胞肥大，可能是由于新生大鼠心肌细胞上UII受体表达较少原因。 最后我们构建了含有ull受体GPRl4的腺病毒载体，为以后研究GPRl4的功能 及Uu的作用提供基础。 总之，本实验首次观察到u II通过PKC信号通路的串话对血管 ll和Ang Il缩 收缩有协同作用，PKCa／pll可能参与了协同作用，并且不同PKC亚型在U 血管的不同时段起不同的作用。UII对SHR收缩作用强于WKY。这对于进一步 揭示UII在心血管疾病中的作用和其作用的机制将具有十分重要