禾长蠕孢稗草专化型(Helminthosporium+gramineum+Rabenh+f.sp.echinochloae)代谢产物防治稻田杂草与病害的研究.pdfVIP

第四届全国绿色环保农药新技术、新产品交流会暨第三届生物农药研讨会 f． Rabenh 禾长蠕孢稗草专化型(Helminthosporiumgramineum 余柳青H+，段桂芳1’2，张建萍1，周勇军1，陆永良1 (1中国水稻研究所杭州310006 2华东理工大学生物工程学院上海200237) A，其分子量为 摘要：从禾长蠕孢稗草专化型菌株的菌丝体和发酵液中分离得到一种倍半萜类化合物0phiobolin uM，对水稻纹枯病菌的抑制作用均显著高于井冈霉 400，分子式为c。。H。。04，对无芒稗的抑制活性(IC。。)达到7．5 素。显示ophiobolinA具有开发微生物除草剂和杀菌剂的潜力。 A；稗草；水稻纹枯病：生物防治 关键词：禾长蠕孢稗草专化型；Ophiobolin 真菌微生物除草剂防治杂草的主要活性物质是植物毒素，包括多肽类化合物、萜类化合物、大 从L—toxin、Cornexistin和Tentoxin等均具有除草活性咄1。 中国水稻研究所口1从自然感病的稗草上分离到病原真菌禾长蠕孢稗草专化型 (胁砌勘thosporiumgr砌inP锄Rabenh X10。 HGE的杀草机理，我们开展了对HE主要代谢产物及其应用技术的研究。 1材料与方法 1．1材料 Rabenh gr锄ineum 菌种：(1)禾长蠕孢菌稗草专化型(ttelminthosporium solani kuhn)菌种由中国水稻研究所植病组提供， 简写为HGE)。(2)水稻纹枯病菌(Rhizoctonia PDA斜面，冰箱(4℃)保存备用。 靶标杂草：无芒稗(Echinochloa 液体发酵培养基(PDB)：马铃薯2009，葡萄糖209，水1000mL。 1．2方法 代谢产物的分离纯化：培养14d后的禾长蠕孢菌液体培养物用4层纱布分离菌丝体和发酵液， 发酵液在40。C下减压浓缩至原体积的一半，用等体积乙酸乙酯分三次萃取，合并萃取相减压浓缩； 菌丝体用适量乙酸乙酯浸提三次，合并有机相后减压浓缩，并与发酵液萃取物合并得到粗毒素。硅 胶柱层析色谱法分离粗毒素，正己烷和乙酸乙酯的混合溶剂梯度洗脱，薄层层析色谱(TLC)检测洗 脱部分，合并同类相，其中正己烷和乙酸乙酯(4：1)洗脱部分抑菌活性最高。此部分再用硅胶柱 层析色谱分离，洗脱剂用氯仿：甲醇(150：1，v／v)，得纯化合物白色针状晶体物质。 500 的测定频率为500MHz。NMR实验包括”C，1H，1H一1H eV。 所用质谱仪为MicromassLCT，离子化能量为2140 除草活性测定：无芒稗种子经浸种催芽后，选取根长2mm左右的种子放入加有被测物质溶液(用 18) ’基金项目：国家自然科学基金课题；浙江省科技攻关项目(2004C32003，2005C220 料通信作者：1iuqyu53@yahoo．com．cn；2在读博士研究生． 第四届全国绿色