基于纳米金颗粒增强的电化学传感器研究.pdfVIP

第24卷专辑 中国稀土学报 2006年lO月 V01．24 JOURNALOFTHECHINESERAREEARTHSOCIETY Oct．2006 Spee．I,sd；llC 基于纳米金颗粒增强的电化学传感器研究 李 丹1·扩，陈启元1，张玲2，陈平2 (1．中南大学化学化工学院，湖南长沙410083；2．长沙理工大学化学与环境工程系，湖南长沙 410076) ■要t以玻碳电极为基础电极，沉积聚丙烯胺与纳米金混合膜于电极表面，用以分别固定酶或免疫球蛋白(196)抗体，制得两种酶催 化信号放大的电化学传感器，用于分别测定H202和人血清中IgG含量。探讨了传感检测的主要实验条件如抗体浓度、温度、pH值对电 极响应的影响；在优化的实验条件下，该传感器可在2．O～14．0me,a-．的浓度范围定量测定免疫球蛋白含量，检测限为1．5medL。同时， 的固定化方法和酶催化信号放大技术制得的电化学免疫传感器，具有灵敏度高、选择性好、响应迅速，在实际样品测定的应用中结果良 好． 关健词：纳米金；酶催化；免疫反应；电化学传感器 中图分类号：0657．15文献标识码：A 文章稿号：1000-4343(2006)-0287．05 生物传感器是利用生物物质作为识别元件， 根过氧化物酶和免疫球蛋白抗体分子，借助纳米 将被测物质的浓度与可测量的电信号关联起来的 金颗粒增强和酶催化放大作用，并基于生物(免 灵敏检测器件。生物传感器中研究得比较多的是 疫)识别反应，分别构建成高灵敏的电化学免疫 酶传感器、电化学免疫传感器。在免疫反应发生 传感器用于测定H202和人血清中免疫球蛋白 时，抗原和抗体的结合会导致工作电极表面微环 (IgG)含量，获得了令人满意的结果。 境的改变，表现为电流、电压、电导率等电化学 信息的变化，利用这些信息变化来检测相应的分 1实验部分 析物，制得电化学免疫传感器【l。3】。在这类传感器 1．1仪■与试剂 Model 中，蛋白质分子如抗体或抗原的固定方法在固定 283恒电位仪(美国)，辣根过氧化物酶 稳定性、活性保持和传感器使用寿命等方面有很 标记的二抗(抗IgG抗体)(上海丽珠生物技术有 高的要求。近年来，纳米金由于其独特的光学、 限公司产品)；抗体(冻干羊抗人IgG诊断血清， 电学及物理化学性质，已开始在生物分析领域中 上海生物制品研究所制)、抗原(免疫球蛋白参考 获得广泛应用【¨】。研究表明，纳米金具有比表面 血清，上海生物制品研究所)，30％的H。0z，聚丙 积大、表面反应活性高或活性中心多、生物亲和 烯酰胺以及其他试剂均为分析纯，实验用水为二 性好、吸附能力强等性质，对酶、血凝素、蛋白 次蒸馏水，对苯二酚溶液用时现配，磷酸盐缓冲 质抗原和抗体等生物分子的固定量大，且能使其 溶液(PBS)由0．01 活性得以有效保持[10,11]。此外，利用辣根过氧化制。 物酶催化H202还原体系研制成的电化学传感器， 1．2金涪胶的制备 具有极高的电化学响应性能，已被广泛用于对免 金溶胶采用鞣酸一柠檬酸钠还原法制得u副： 疫目标分子的检测【6一引。 按如下比例配制溶液A和溶液B。溶液A：lml 本文利用纳米金独特的理化性能，将纳米金 ml 的1％HAuCh加入到79m水中；溶液B：在4 颗粒引入到聚丙烯酰胺聚合物中，形成聚丙烯酰 的1％柠檬酸三钠溶液中，加入0．1ml的1％鞣酸， 胺．纳米金复合物，再利用复合物分别吸附固定辣 然后加水至20ml。将溶液A和溶液B分别加热至