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三七皂苷R1作为甲型肝炎疫苗佐剂的研究 陶里段金梅舒晓明 胡凝珠兰芸 白巍 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所，昆明，650118 【摘要】 目的探索补益类中药三七的成分之一三七皂苷R1增嘱甲型肝炎病毒(HAv)抗原的免疫原 性、降低铝佐剂用量的可行性。方法在HAV抗原中，加入不同剂量的铝佐剂和三七皂苷R1所构成复合佐剂， 小鼠经肌肉注射免疫，每隔4周检测体液免疫水平，与不加佐剂组和单独铝佐剂组进行抗体水平比较。结果 各实验免疫组抗体水平在12周时达到最高，之后逐渐下降；在抗原中加入三七皂苷Rl后，与无佐剂组相比， IgG水平显著升高(P0．05)；与铝佐剂组相比，加入一定剂量的三七皂苷Rl也能够显著增强特异性抗体水 平，且抗体水平维持时间长。结论适当剂量的铝佐剂和三七皂苷R1混合作为佐剂，具有协同增强铝佐剂的 效果，并能在降低铝佐剂剂量的情况下使抗体水平达到与高剂量铝佐剂组相同的免疫效应。 【关键词】三七皂苷R1；佐剂；HAV抗原；体液免疫 三七为五加科(Araliaeeae)人参属植物的干燥 材料与方法 根，是我国特产的传统珍贵药材，主产于云南、广西 等省区。三七主要含有皂苷、多糖、氨基酸等化学成 1．实验动物 分，《本草纲目》将三七的功效概括为“止血压、散血、 ICR健康小鼠，SPF级，雌性，6，8周龄，18— 止痛”…。而三七总皂苷是三七活血化淤功效应用 209，由中国医学科学院北京协和医学院医学生物学 的物质基础，三七总皂苷中含有多种人参皂苷及三 研究所灵长类实验动物中心提供，并按实验动物中 心的方法饲养。 七皂苷，其中三七皂苷R1(SanchinosideR1，SRl)是三 七总皂苷中最具代表性的特征化合物。通过对其结 2．主要试剂与仪器 ELISA检测试剂盒(购自KPL公司)，酶标板购 构式的分析，我们发现它与人参皂苷(ginsenoside)的 Micro． 结构相似，都属达马烷型四环三萜皂苷(图1)。研 自美国eBiosciene公司。酶标仪为Bio—RAD readerModel 究发现，人参皂苷与铝佐剂合用，能够显著增强机体 plate 550(购自美国Bio-RAD公司)。 对抗原的免疫应答，并能使机体Thl和Th2免疫应 3．抗原与佐剂 答达到平衡[2】。多种传统补益类中药的有效成分能 剂均由本室保存。三七皂苷Rl，购自昆明同持医药 够增加腹腔巨噬细胞(M①)、自然杀伤细胞(NK)、细 研究有限公司。 胞毒T细胞(CTL)和淋巴因子激活的杀伤细胞 4．实验1不同剂量三七皂苷R1对甲肝灭活疫 (LAK)的数量，促进白介素(IL-12)、粒细胞一巨噬细 苗免疫效果影响 胞集落刺激因子(GM．CSF)、干扰素(IFN)等细胞因 子的分泌，加强细胞因子的作用，并能激活T细胞、B 4．1免疫动物：将ICR雌性小鼠随机分成六组， 细胞，活化补体促进提高机体的免疫功能，产生免疫 除生理盐水空白对照组、对照组为HAV抗原0．1ml 调节作用[3]。根据以上分析，本实验采用HAV灭活 的成分外，分别加入三七皂苷R1 病毒作为抗原，以三七特有的皂苷Rl及铝佐剂的混 20