肉苁蓉种内变异地AFLP标记研究.pdfVIP

第29卷专刊 宁夏大学学报(自然科学版) 2008年7月 of V01．29 Journal Science Jul．2()08 Spec NingxiaUniversity(NaturalEdition) 肉苁蓉种内变异的AFLP标记研究 甘晓燕，李 苗，马洪爱，宋玉霞。 (宁夏农业生物技术重点实验室，宁夏银川 750002) desert／co／a 摘要：利用AFLP对内苁蓉(C／stanche Ma)种内9种变异类型进行亲缘关系鉴定．从64对引物组合中选出扩增带纹丰 富清晰，且多态性较好的引物组合15对，共扩增出条带266条，多态性条带148条。多态性位点百分比为55．6％．对AFLP扩增结 果采用UPGMA法进行聚类结果表明：9种不同类型内苁蓉遗传距离的变异范围在0．1778—0．8462之间． 关键词：肉苁蓉；AFLP；亲缘关系 分类号：(中图)Q949．95 文献标志码：A 种质的遗传多样性评价是植物育种研究的一个重要内 下水位深10m，群落内主要分布有旱生和超旱生植被，建群 容，它决定了这些种质在今后育种实践中的有效利用．以往 SOOn- caUina 利用形态标记、系谱分析、配合力表现以及同工酶等方法来 gorica(Pall．)Maxim)、猪毛菜(SalsolaY．L．Chang)、 研究种质资源的遗传多样性表现出一定的局限性．而DNA 沙蒿(Artem／s／a mort,- 分子标记技术的发展可为其研究提供了新手段，在多种分子 go／／cus)等． 。 标记方法研究中，扩增片段长度多态性(AFLP)技术又被认1．2方法 为是一种很好分子标记方法，它既有RFLP的可靠性，又有 1．2．1取材在野外依据肉苁蓉种内个体间花冠裂片的不 同颜色，初步将肉苁蓉种内变异划分为9个类型，9种花冠 RAPD的方便性，而且所需DNA最少，莺复性强，在一次扩 裂片颜色分别为：乳白色(类型I)、黄白色(类型II)、粉白 增中，可产生条带多等特点，因而被广泛用于基因作图、基 因定位、亲缘关系鉴定¨。J． (Ⅶ)、紫色(Ⅷ)、茄紫色(ix)。采用肉质茎为实验材料．将肉 deserticola 肉苁蓉(CistancheMa)为名贵中药材，为国家 质茎切成薄片状1s／袋存放，在超低温冰箱中待用． 二级保护植物p1，属于一种具有寄生生长特性的药用植物， 1．2．2模板DNA的制备采用改进的CTAB法提取肉苁 主要分布于内蒙、甘肃、宁夏、新疆及青海等地的荒漠地带， 蓉基因组DNAp’． 对其药理作用等已开展了大鼍的研究工作∞o．肉苁蓉种群 1．2．3AFLP扩增采用购自鼎国生物公司的AFLP试剂 内具有多种花冠颜色类型的个体，很有必要搞清它们是遗传