第五章 质谱.pptVIP

* 稳定同位素样品制备 用同位素质谱计测定样品的C、H、O、S等同位素组成之前，须先将样品转变为相应的气体，如H同位素分析采用氢气，C、O同位素分析采用CO2气体，S同位素分析采用SO2或SF6气体 LTQ-Orbitrap组合式高分辨质谱仪对饲料中同分异构体除草剂残留的鉴定 * MS1结果 MS2结果 MS3结果 使用iTRAQ标记和LTQ Orbitrap 定量分析DNA损伤反应蛋白质 * Camptothecin Determined by Western blot Determined by LTQ Orbitrap 结果： 超过500个蛋白被进行了定量鉴定； 145个磷酸化修饰的蛋白被鉴定到。 * * 3 . 烯丙基裂解和苄基裂解 这两个裂解十分常见： * 4 . 在质谱中裂解的其它表示法 键的断裂位置 碎片离子的质量 形成质量为15和58的两种碎片离子 * 6. 质谱中离子碎片的类型 分子离子 同位素离子 碎片离子 亚稳离子 多电荷离子 * 一、分子离子和分子离子峰的判断 有机分子被高能电子流轰击掉一个电子形成的离子即为分子离子。 分子离子峰位于质谱图中质荷比最高位置的一端，该峰就是分子离子峰，该峰的质量数就是分子量。 质谱中测得的分子量是分子的真实质量，而化学计算得到的分子量是各元素同位素平均质量之和，如： 1 . 分子离子（M＋． 或 P ） 在质谱图上，与分子离子相对应的峰为分子离子峰。 * 甲烷的分子量 质谱测得：12.0000 十 1.0078×4 ＝ 16.0312 在低分辩的质谱中只取整数部分 分子离子：12 十1×4＝16 同位素离子( 13C1H4 )：13 十1×4＝17 同位素离子(12C2H1H4 )：12 十2 十1×3＝17 * 2. 分子离子峰的判断 一般可从质谱图上直接读出，但如果分子离子不稳定，则谱图上就不出现分子离子峰，所以要注意识别，不要把碎片离子峰误认为是分子离子峰。 判断分子离子峰的方法： ⑴ 分子离子峰一般是质量数最高端的强峰，同位素离子峰的质量数可能更高，但一般较弱，容易识别；如 * * ⑶ 看最高质量峰与邻近峰的质量差是否合理 若最高质量峰与邻近峰的质量差是 1，15，18是合理的 邻近峰的质量数 分子离子失去的原子或基团 M-1 H M-15 CH3 M-18 H2O 若最高质量峰与邻近峰的质量差是 4～13 都是不合理的（无法解释，如：分子离子不可能同时失去 4 个H原子） ⑵ 氮素规则： 含奇数个氮原子的分子，分子量必为奇数，否则为偶数。 （即：不含或含偶数个氮原子的，分子量必为偶数。） * ⑷ 被认为的分子离子峰的强度与假定的分子结构必须相适应 例如，芳香族化合物的分子离子峰很强，有时是基峰； 环状化合物的分子离子峰也很强，因为它们断裂一个键生成链状，并不出现碎片离子。 在质谱中，分子离子的稳定性次序为： 芳香化合物＞共轭链烯＞脂环化合物＞硫化物＞直链烷烃＞硫醇＞酮＞胺＞酯＞醚羧酸＞分支较多的烷烃＞醇 * ⑸ 改变实验条件验证分子离子峰 ① 降低电子流轰击的能量，减少分子离子的裂解，增加分子离子峰的强度。 ② 采用化学电离源、场离子源或场解吸来代替电子轰击源。 ③ 制备容易挥发的衍生物，如将酸变为酯，将醇变为醚进行测定，这样的衍生物分子离子峰容易出现。然后对比化合物转变前后的质谱，观察是否出现了相应的质量变化。 ④ 对于分子量较大的难挥发有机物，改用直接进样法（不用加热进样法）可使样品受热温度降低，受热时间缩短，增加分子离子峰的强度。 * 二、同位素离子 组成有机化合物常见的十几种元素如 C、H、O、N、S、Cl、Br 等（除F、P、I 以外）都有同位素，它们的天然丰度 由于这些元素（F、P、I 除外）都有同位素，所以在质谱中会出现由不同质量的同位素形成的同位素峰，同位素峰的强度比与同位素的丰度比是相当的 元素一般以同位素混合物的形式存在，有机分子中的元素也都是同位素的混合物，重的同位素比轻的同位素重1－2个原子质量单位，所以在分子离子峰的右边1－2个质量单位处，常出现重同位素的分子离子峰。 由同位素引起的峰叫同位素离子峰。用M + 1，M + 2等来表示。 * 同位素离子峰的强度：与原子种类有关（不同原子种类的同位素天然丰度不同），与该原子个数有关。 例如，甲烷含一个C原子，13C 的丰度约为12C 的1.1%，所以 M+1 峰的强度是 M 峰的1.1% ，见下图： * 三、碎片离子及其断