酶解魔芋葡甘聚糖凝胶稳定性的研究.pdfVIP

酶解魔芋葡甘聚糖凝胶稳定性的研究 温成荣，唐胜春，黄丹，刘姗姗，庄昱，陈清萍 福建农林大学食品科学学院，福州 (350002) E-mail ：a5717834@163.com 摘 要：本文探讨了魔芋葡甘聚糖的酶解及其产物凝胶稳定性的影响。通过控制酶解时间、 酶解温度、酶量、pH 值及底物浓度来调节酶解，进行魔芋葡甘聚糖（简称 KGM ）的降解和 纯化，制备了不同分子量的KGM 试样。同时，考察酶解时间和高聚物浓度等操作条件对所测 分子量和分子量分布的影响。酶解条件为：酶解温度为 50℃、3g 魔芋葡甘聚糖、酶解液 pH 值为 6 ，酶解时间30min、180 U/g 的酶浓度时凝胶稳定性最好。酶解产物的的凝胶稳定性受 分子量的影响。结果表明，不同酶解的条件，产物的分子量不同，且KGM 凝胶稳定性与分子 量成正相关关系。 关键词：魔芋葡甘聚糖；凝胶稳定性；酶解 研究多糖凝胶的稳定性要从其结构入手。但是多糖本身分子量大，结构复杂，这就造成 了研究上的困难，为了进一步研究其结构特性，考虑降低其分子量。多糖分子量大小不同， 其凝胶性能不同，生理活性也不一样；将多糖降解，其分子量降低，结构会发生变化，凝胶 [1,3] 的稳定性也会相应改变 。 本实验利用凝胶排阻色谱法测定了一系列标样葡聚糖的分子量分布，并对实验所用的凝 胶排阻色谱进行了普适标定，测定酶解后的KGM 试样的分子量大小，并进一步考察酶解时间 和高聚物浓度等操作条件对所测分子量和分子量分布的影响，最后分析了分子量对魔芋葡甘 聚糖稳定性的影响，以便为魔芋葡甘聚糖的稳定性研究提供参考。 1. 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 原料 魔芋葡甘聚糖，纤维素酶，葡聚糖标样 1.1.2 仪器 紫外可见分光光度计，恒温磁力加热搅拌器，电热鼓风干燥箱，721-分光光度计，恒温水 浴锅，粘度计，冷冻离心机，液相色谱仪 1.2 方法 1.2.1 酶解方法设计 [4] 魔芋葡甘聚糖酶解方法设计参考(杨文博，1996) 。 1.2.2 粘度测定 将魔芋葡甘聚糖制成3%浓度的溶胶，用国产NDJ-9S 数显粘度计在25 ℃下测定检测魔芋 葡甘聚糖溶胶的表观粘度，参考(苏荣欣，2004) [5] 。 1.2.3 魔芋葡甘聚糖含糖量的测定 [6] 采用硫酸蒽酮比色法测定魔芋葡甘聚糖含糖量，方法参考(吴万兴，1994) 。 - 1 - 1.2.4 魔芋葡甘聚糖的酶解水解率的测定 [7] 魔芋葡甘聚糖的酶解水解率的测定方法参考（林颖等，1996） 。用下列公式计算魔芋葡 甘聚糖的酶水解率： 酶解液还原糖量(g/ mL) 水解率 100% 葡甘聚糖总糖量（g/ mL ） 1.2.5 最佳酶解条件的确定 不同分子量魔芋葡甘聚糖制备过程中，酶解是关键的一步，影响酶解有以下几个因素： 酶解温度、酶解时间、酶解pH值、酶量、魔芋葡甘聚糖的浓度，确定最佳酶解条件。 1.2.6 分子量测定 以粘度变化为参考指标，选择3g 魔芋葡甘聚糖加入酶活力180U 的纤维素酶,在50℃条件 下，pH 值为6.0，100 mL 水中分别反应10min、20min 、30min，制备不