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食品生物技术课程复习思考题 2012.11.29 一、细胞工程与基因工程部分复习参考题 基因工程的概念与特征。 基因工程在食品工业中的应用。 试举一简单例子阐明基因工程的主要研究内容。 什么是基因？ 动物、植物遗传转化方法及其过程。 PCR的原理、反应过程以及影响PCR 扩增产量与质量的因素分析，并简单阐述此技术有何应用？ 基因工程药物的研究程序。 请综合分析转基因生物的安全性并探讨植物转基因的未来发展方向。 植物组织中基因组DNA的提取原理。 质粒DNA提取方法主要有哪些？提出的DNA有哪些构型？结合已做的实验分析影响实验结果的各种可能因素。 凝胶电泳分离核酸的机理及其影响因素。 电泳指示剂类型和作用。 Ct 值的定义。 假设通过转基因技术，获得一株具有抗旱靶性状的转基因水稻，但此转基因水稻比非转基因对照水稻在株高上出现矮化现象。试分析如下问题：（1）、如何确认此苗是转基因苗？（2）、转基因水稻中靶基因是否表达？表达量如何？（3）、转基因水稻株高矮化可能是什么原因？ 什么是星活性？ 限制性内切酶的概念与类型，并分析影响限制性内切酶活性的因素 基因工程连接酶有哪些类型？试分析影响连接酶连接效果的可能因素。 DNA聚合酶类型主要有哪三种？ 大肠杆菌DNA聚合酶I与大肠杆菌DNA聚合酶I 大片段（Klenow片段）的关系与异同点。 基因工程载体的功能是什么？应具备怎样的条件？ 什么是质粒的不相容性？ 化学转化法（CaCl2法) 的转化原理。 影响转化率的主要影响因素。 重组体分子的选择与鉴定方法。 什么叫核酸分子杂交？主要包括哪些类型？ 简单阐述Southern杂交基本操作过程，并分析影响杂交结果的可能因素，此技术有何应用。 基因文库类型有哪些？有何差别？并简单阐述基因组文库的构建过程。 基因的克隆方法主要有哪几大类型？并简单阐述蛋白质序列克隆法克隆基因的原理。 T-DNA标签法克隆基因技术路线。 请简单阐述SH在mRNA水平上克隆差异表达基因的机理。 表达载体主要有哪些元件构成？ 什么是启动子？有哪些类型？表达系统中启动子须具备怎样的条件？ 表达系统常选用哪种启动子？为什么？ 外源基因在大肠杆菌表达系统中的蛋白表达部位有哪些？表达蛋白有哪些形式？ 试分析影响外源基因表达效率的因素，如何提高外源表达水平？ 细胞工程的含义，根据研究对象的不同可以分为哪些类型？ 细胞工程实验室必须满足哪三个基本的需要？基本实验室中各部分有何作用？设计上各有何要求？ 离体培养的培养基据营养需求主要包含哪些成分？ 培养基按用途可以划分为哪些类型？ 什么是愈伤组织？愈伤组织是如何形成的？经历哪些过程？ 愈伤组织形成的影响因素主要有哪些？ 从外植体形成器官或细胞无性系的形态发生主要有哪两种方式？两者有何区别？ 愈伤组织形态发生主要受哪些因素调控？ 一个成功的悬浮细胞培养体系必须满足怎样的条件？ 细胞固定化培养及其特点。 植物细胞培养中提高代谢产物的技术有哪些？ 在离体条件下动物细胞生长方式及培养方法，尤其是大规模培养技术。 动物细胞体外生长的要求主要考虑哪些因素？ 细胞融合的概念、方法、类型及意义，如何鉴定融合子？ 动物细胞工程在生产上有何应用？抗体如何生产？ 二、食品酶工程复习思考题 （本部分为李老师以前提供，现在是否调整我不清楚，请同学联系李老师确定。） 酶工程概论 明确概念：酶、酶活力、比活力、酶的活性中心、酶工程； 了解酶工程的分类和发展历史； 认识酶与一般催化剂的相同点和不同点。 酶的生产 目前酶有哪三种生产方式？各有何优缺点？怎样应用？ 酶的发酵生产有哪三种方法？各有何优缺点？怎样应用？ 酶的发酵生产对菌种有何要求？特别是安全性方面FAO/WHO有哪三点基本要求？ 提高酶产量的措施有哪些？其机理何在？ 酶的分离纯化 酶制剂制备的基本步骤有哪些？其各有何方法？原理何在？ 课堂上主要介绍了哪些酶纯化与精制方法？其原理何在？ 酶分离提取过程中怎样判定酶的纯度？ 酶应怎样保存？ 酶分子的修饰与改造 目前酶分子修饰与改造主要有哪二条途径？ 酶分子修饰有哪几种方法？其原理何在？怎样应用？ 酶分子修饰后性质有何改变？ 生物催化剂的固定化 明确概念：固定化酶、酶反应器、酶传感器、酶电极； 酶/细胞固定化的方法有哪几类？各有哪些具体方法？其优缺点如何？怎样应用？ 酶/细胞固定化后的性质有何变化？ 酶/细胞固定化的评判指标有哪些？ 酶反应器有哪些主要类型？ 酶反应器的性能主要有哪些评价指标？ 酶传感器的设计原理是什么？目前有哪些应用？ 特别说明：复习参考题不是考试题，主要便于大家复习用。