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血小板贮存损伤研究进展_医学论文 血小板贮存损伤研究进展_医学论文 关键词：血小板贮存超微结构糖蛋白 　　血小板贮存损伤(ThePlateletStorageLesion,PSL)是指从采血、制备、储存到把血小板用于病人的这一过程中，血小板因受到各种理化因素的影响，形态和功能受到损伤。近年来，临床对血小板的需求不断增加，血小板的制备和储存状况也逐步改善，但是PSL的存在严重影响了血小板的输后体内恢复率及寿命，削弱了临床治疗效果，甚至引起输注无效。因此对PSL机理的研究和预防措施的探索成为输血医学领域的一项重要课题。笔者就近年来对PSL的研究和进展综述如下。 　　1　血小板超微结构改变 　　1.1　形态 　　未活化的血小板呈光滑的双面凸盘状体，直径约3～4μm。按血库标准制备的新鲜血小板，形态发生轻微改变，出现棘突、伪足和弱聚集。这些改变经37°C孵育30min后可逆转［1］。在贮存期间，因活化或新陈代谢衰竭导致血小板膜屏障功能受损，从而引起血小板肿胀甚至溶解。22°C振摇保存24h，约有3%～5%的血小板溶解或气球样变；保存5d，增至5%～10%；若保存不当，受损血小板可达95%［2］。 　　1.2　贮存颗粒 　　α-颗粒控制着血小板在血液凝固、炎症修复过程中的功能。保存3d，α-颗粒电子密度下降，部分α-颗粒融合形成大的混合颗粒；保存5d，采用富血小板血浆法制备的浓缩血小板(PRP-PC)中的α-颗粒明显减少，但用白膜法制备的浓缩血小板(BC-PC)中的α-颗粒数量则保持相对稳定。致密体是血小板受到兴奋刺激后发生释放反应的贮存场所，α-颗粒和致密体通过与开放管道系统(OCS)融合进行释放。在颗粒释放的同时，血小板表面糖蛋白GMP-140表达增强，这一特性可用来评估浓缩血小板在制备和保存过程中活化的程度。在α-颗粒中，有许多物质并非源自巨核细胞或由血小板自身合成，而是从血浆吞噬而来，故可推测，贮存血小板输到体内后，α-颗粒可通过细胞摄粒作用而得到恢复［3］。 　　1.3　OCS 　　OCS是血小板特有的内膜系统，由外部浆膜内陷构成，贯穿整个血小板形成许多管腔。OCS具有“双行道大街”的作用，即血浆与血小板内部进行物质交换的通道。除摄入和分泌作用外，OCS还是伪足伸延的膜贮备场所。新鲜血小板的OCS管腔直径很小，随保存时间延长逐渐增大。这由于α-颗粒与OCS融合引起了OCS肿胀。在保存3d以上的血小板中可观察到α-颗粒与OCS融合的现象，随保存时间延长，血小板中的OCS逐渐减少，溶解了的血小板中不再有OCS［1］。 　　1.4　细胞骨架 　　血小板中的肌动蛋白和肌凝蛋白微丝组成细胞骨架，在血小板的变形、颗粒释放、伸展和血块收缩中起着重要作用。在释放反应中肌动蛋白与α-颗粒膜蛋白结合，参加颗粒的能量依赖性运输。随着保存时间的延长，血小板代谢能力耗尽，运输颗粒到浆膜外层的能力丧失，肌动蛋白的Ca2＋依赖性蛋白水解导致了膜骨架功能损伤，浆膜脂质双层稳定性下降，血小板对内皮细胞产生强有力的粘附，微泡增多，膜内侧的磷脂酰丝氨酸(PS)暴露到膜表面，形成血小板3因子(PF3)，促使因子X活化和凝血酶原转变为凝血酶。血小板保存5d后，PF3活性可增加12倍，血小板出现广泛聚集［4］。 　　2　血小板功能及代谢的改变 　　2.1　糖蛋白GPⅡb/Ⅲa与血小板聚集功能 　　在制备和保存过程中血小板受到各种刺激被活化，GPⅡb/Ⅲa与纤维蛋白和其它粘连蛋白(如vWF)结合，引起血小板骨架结构改变，在血小板之间形成蛋白桥链，促成血小板聚集，故血小板聚集试验可用来评估PSL。初期的血小板聚集反应具有可逆性，保存几天后，血小板新陈代谢耗尽，PSL逐渐发生。保存5d的浓缩血小板用ADP刺激，不发生聚集反应；然而加入新鲜血浆孵育之后，聚集部分恢复。这是由于新鲜血浆除提供基本能量外，还补充了某些在保存中丧失了的未知成份。由此可见，贮存血小板输到体内后能适度恢复其生理功能和生存能力。 　　2.2　血小板膜脂质 　　血小板脂膜双层主要由磷脂组成。各种磷脂在质膜两侧呈不对称性分布，未活化前主要是神经鞘磷脂(SPH)，部分磷脂酰胆硷(PC)，磷脂酰乙醇胺(PE)分布在外层；而80%的磷脂酰肌醇(PI)和90%以上的磷脂酰丝氨酸(PS)分布在内层。当血小板活化时，PS转向细胞膜外侧面，为血浆凝血因子的活化提供了催化性脂质表面，即PF3。这种血小板磷脂的动态分布对血液凝固具有限速的作用。在贮存期间，所有磷脂都有规律地减少，但磷脂分布特征维持不变。Koerner等［5］用流式细胞仪检测发现，丧失的磷脂(如PF3)主要与大微泡结合，而这些微泡的表面有GPⅡb/Ⅲa和Ⅰb，认为在贮存期间由于血小板活化导致了微泡的形成。在血小板磷脂丧失的同时，磷脂功能