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如何用好HPLC 如何用好HPLC 得到好结果的技巧 得到好结果的技巧 河北汇博云海科技发展有限公司 市场部 张友全 2007年10月 岛津国际贸易（上海）有限公司 讲解要点 讲解要点 p 液相色谱常见问题及其对策 p 液相色谱容易出问题的部件 p 其它问题的汇总 p 处理故障的原则 液相色谱常见问题及其对策 液相色谱常见问题及其对策 p 压力异常 （偏高、波动） p 漏液 p 保留时间漂移 p 基线问题 （漂移、噪声） p 峰形异常 液相色谱常见问题及其对策 p 压力异常 （偏高、波动） 现象：无压力，流动相不流动 可能原因 1、保险丝断或电源问题 2、柱塞杆折断 3、泵头内有空气或流动相不足 4 、单向阀损坏 5、漏液 6、压力传感器损坏(流动相流动正常，但无压力) 液相色谱常见问题及其对策 p 压力异常 （偏高、波动） 现象：压力持续偏高或不断上升 1、流速设定过高 2、保护柱或柱子筛板堵塞 3、流动相使用不当或有缓冲盐析出 4 、色谱柱选择不当 5、进样阀损坏 6、线路过滤器堵塞 液相色谱常见问题及其对策 p 压力异常 （偏高、波动） 现象：压力持续偏低 1、流速设定过低 2、色谱柱选择不当 3、柱温过高 4 、系统漏液 液相色谱常见问题及其对策 p 压力异常 （偏高、波动） 现象：压力波动 可能原因 1、泵头中有气泡 2、单向阀损坏 3、柱塞密封圈损坏 4 、脱气不充分 5、系统漏液 6、使用了梯度洗脱 液相色谱常见问题及其对策 p 漏液 接头处漏液 1、接头处松动 2、接头磨损 3、接头被污染 4 、部件不匹配 液相色谱常见问题及其对策 p 漏液 泵漏液 1、单向阀松动 2、泵密封损坏 3、放空阀损坏 4 、接头松动 （不要拧的太紧） 液相色谱常见问题及其对策 p 漏液 进样阀漏液 可能原因 1、转子密封损坏 2、定量环堵塞 3、进样口密封松动 4 、进样针尺寸不合适 5、废液管产生虹吸 6、废液管堵塞 液相色谱常见问题及其对策 p 漏液 检测器漏液 可能原因 1、流通池垫片损坏 2、流通池透镜破碎 3、手紧接头处漏液 4 、废液管堵塞 5、流通池堵塞 液相色谱常见问题及其对策 p 保留时间漂移 保留时间漂移 可能原因 1、柱温变化 2、流动相组分变化 3、色谱柱没有平衡 4 、流速变化 5、泵中有气泡 6、流动相选择不当 7、键合相流失 8、缓冲容量不够 液相色谱常见问题及其对策 p 基线漂移 基线漂移 可能原因 1、温 波动 2、流动相不均匀(脱气，使用纯度更高的溶剂) 3、流通池被污染或有气泡 4 、流通池窗口破裂 5、流动相配比不当或流速变化 6、柱子平衡 （约30－60min） 液相色谱常见问题及其对策 p 基线漂移 基线漂移 可能原因 7、流动相污染，变质或由低品质溶剂配成 8、样品中有强保留的物质以馒头样峰被洗出 9、检测器没有设定在最大吸收波长处 液相色谱常见问题及其对策 p 基线问题 基线噪声 （规则的） 可能原因 1、流动相、泵、检测器中有气泡