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第八章 质谱法（Mass Spectrometry， MS） 质谱法是通过将样品转化为运动的气态离子并按质荷比(M／Z)大小进行分离并记录其信息的分析方法。 从20世纪60年代开始，质谱法更加普遍地应用到有机化学和生物化学领域。化学家们认识到由于质谱法的独特的电离过程及分离方式，从中获得的信息是具有化学本性，直接与其结构相关的，可以用它来阐明各种物质的分子结构。正是由于这些因素，质谱仪成为多数研究室及分析实验室的标准仪器之一。 8-l 质谱仪 (一）工作原理 质谱仪是利用电磁学原理，使带电的样品离子按质荷比进行分离的装置。离子电离后经加速进入磁场中，其动能与加速电压及电荷Z有关，即 （二）主要性能指标 1．质量测定范围 表示质谱仪所能够进行分析的样品的相对原子质量（或相对分子质量）范围，通常采用原子质量单位（unified atomic mass unit，符号u）进行度量。原子质量单位是由12C来定义的，即一个处于基态的12C中性原子的质量的1/2，即 在非精确测量物质的场合，常采用原子核中所含质子和中子的总数即“质量数”来表示质量的大小，其数值等于其相对质量数的整数。 测定气体用的质谱仪，一般质量测定范围在2～100，而有机质谱仪一般可达几千。现代质谱仪甚至可以研究相对分子质量达几十万的生化样品。 2．分辨本领 指质谱仪分开相邻质量数离子的能力，一般定义是：对两个相等强度的相邻峰，当两峰间的峰谷不大于其峰高10％时，则认为两峰已经分开，其分辨率 在实际工作中，有时很难找到相邻的且峰高相等的两个峰，同时峰谷又为峰高的10％。 在这种情况下，可任选一单峰，测其峰高5％处的峰宽W0.05，即可当作上式中的Δm，此时分辨率定义为 R = m/W0.05 质谱仪的分辨本领由几个因素决定： 离子通道的半径 加速器与收集器狭缝宽度 离子源的性质。 质谱仪的分辨本领 分辨率在500左右的质谱仪可以满足一般有机分析的要求，此类仪器的质量分析器一般是四极滤质器、离子阱等，仪器价格相对较低。 若要进行准确的同位素质量及有机分子质量的准确测定，则需要使用分辨率大于10000的高分辨率质谱仪，这类质谱仪一般采用双聚焦磁式质量分析器。 目前这种仪器分辨率可达100000，其价格也是低分辨率仪器的4倍以上。 3．灵敏度 质谱仪的灵敏度: 绝对灵敏度:指仪器可以检测到的最小样品量 相对灵敏度:指仪器可以同时检测的大组分与小组分含量之比 分析灵敏度:输入仪器的样品量与仪器输出的信号之比。 （三）质谱仪的基本结构 质谱仪是通过对样品电离后产生的具有不同m／z的离子来进行分离分析的。 进样系统、电离系统、质量分析器和检测系统。 为了获得离子的良好分析，必须避免离子损失，因此凡有样品分子及离子存在和通过的地方，必须处于真空状态。 1．真空系统 质谱仪的离子产生及经过系统必须处于高真空状态（离子源真空度应达l.3×10-4～l.3×10-5Pa，质量分析器中应达l.3×10-6Pa）。 若真空度过低，则会造成离子源灯丝损坏、本底增高、到反应过多，从而使图谱复杂化、干扰离子源的调节、加速极放电等问题。 一般质谱仪都采用机械泵预抽真空后，再用高效率扩散泵连续地运行以保持真空。现代质谱仪采用分子泵可获得更高的真空度。 2．进样系统 进样系统的目的是高效重复地将样品引入到离子源中并且不能造成真空度的降低。 目前常用的进样装置有三种类型： 间歇式进样系统 直接探针进样 色谱进样系统。 （l）间歇式进样系统 该系统可用于气体、液体和中等蒸气压的固体样品进样，典型的设计如图21．3所示。 通过可拆卸式的试样管将少量（10～100μg）固体和液体试样引入试样贮存器中，由于进样系统的低压强及贮存器的加热装置，使试样保持气态。 实际上试样最好在操作温度下具有1.3—0.13Pa的蒸气压。由于进样系统的压强比离子源的压强要大，样品离子可以通过分子漏隙（通常是带有一个小针孔的玻璃或金属膜）以分子流的形式渗透过高真空的离子源中。 （2）直接探针进样:对那些在间歇式进样系统的条件下无法变成气体的固体、热敏性固体及非挥发性液体试样，可直接引入到离子源中 3．电离源 电离源的功能是将进样系统引入的气态样品分子转化成离子。 由于离子化所需要的能量随分子不同差异很大，因此，对于不同的分子应选择不同的离解方法。 通常称能给样品较大能量的电离方法为硬电离方法，而给样品较小能量的电离方法为软电离方