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第 22 卷第 6 期 分 析 科 学 学 报 2006 年 12 月 Vol . 22 　No . 6 J OU RN AL O F AN AL YTICAL SCIEN CE Dec . 2006 文章编号 :10066 144 (2006) 可用于多种生物分析的高性能芯片 毛细管电泳系统 1 ,2 ,3 1 ,2 ,3 3 3 熊 　强 , 邢婉丽 , 谷光胜 , 孙爱梅 , 郭 　 3 , 程 　京1 ,2 ,3 , 周玉祥1 ,2 ,3 ( 1. 清华大学生物科学与技术系 , 北京 100084 ; 2 . 清华大学医学系统生物学研究中心 , 北京 100084 ; 3 . 生物芯片北京国家工程研究中心 ,北京 102206) 摘 　要 :本文采用激光诱导荧光的检测方法 ,搭建出高灵敏度的双通道共聚焦芯片毛细 管电泳的检测系统 。采用湿法刻蚀玻璃的方法获得了芯片管道的模具 ,并采用浇铸法 在聚二甲基硅氧烷上获得高质量的微管道 。将聚二甲基硅氧烷和石英玻璃贴合成为毛 细管电泳芯片 ,该电泳芯片散热性能良好 ,可重复使用 。以 Cy5 荧光素为样品 ,经实验 ( 证明该系统的检出限为 17 p mol/ L ,并能在高达 1 200 V/ cm 的场强下正常运行 高压 电源的最高输出电压为 1 200 V/ cm) ,最高理论塔板数超过 106 N / m ,表明该系统具有 较高电泳效率 。将该系统应用于氨基酸和 DN A 片段的分离分析 , 以及生物素标记的 DN A 与链霉亲合素的相互作用的检测 ,获得了较好的实验结果 ,说明该系统能够有效 地应用于多种生物分析中。 关键词 :芯片毛细管电泳 ;聚二甲基硅氧烷 ;激光诱导荧光检测 ;生物分析 中图分类号 :O657 . 8 ; Q503 　　　文献标识码 :A 1 　前言 面临 2 1 世纪科技发展中提出的众多挑战 ,分析科学和分析仪器正经历着深刻的变革 。自从 1990 年 ( μ ) [ 1] 由Manz 提出“微型全分析系统”Micro Tot al A naly si s Sy st em , TA S 概念后 ,微型化 、集成化与便携 化成为分析仪器设备的发展趋势 。在众多微型全分析系统器件中 ,芯片毛细管电泳具有分析速度快 ,样品 消耗量少 ,便于集成化 、自动化和微型化等优点 ,有极高的学术和商业价值 。在上个世纪 90 年代 ,Manz 、 Harri son 、Ram sey 、Mat hie s 等人为芯片毛细管电泳领域的飞速发展打下了良好的基础[2 - 4 ] 。 ( ) 本研究以聚二甲基硅氧烷 PDM S 为材料加工出了高质量的毛细管电泳芯片 ,并基于激光诱导荧光 的检测方法搭建了具有较高灵敏度的共聚焦检测系统 。该芯片毛细管电泳系统进行了氨基酸和 DN A 片 段的分离分析 , 以及生物素标记的DN A 与链霉亲合素相互作用的检测 ,获得了良好的实验结果 。 2 　实验部分 2 . 1 　试剂 ( ) ( ) 羟丙基纤维素 H PC ,平均分子量 100 000