野生型KLF6对前列腺癌LNCaP细胞的作用_医学论文.docVIP

野生型KLF6对前列腺癌LNCaP细胞的作用_医学论文 野生型KLF6对前列腺癌LNCaP细胞的作用_医学论文 作者：孙明　黄健　林天歆　庞健　廖勇彬　胡明　陈学中 【摘要】 目的： 探讨野生型抑癌基因KLF6对前列腺癌LNCaP细胞的生长增殖、细胞周期和侵袭转移能力的影响及其可能的作用机制. 方法： 利用RT法克隆目的基因KLF6，并将含KLF6的pEGFP质粒转染入LNCaP细胞. 分为转染组和对照组分别进行MTT法观察LNCaP细胞的生长抑制率,流式细胞仪观察细胞周期比例变化和凋亡率,细胞爬片划痕法观察LNCaP细胞的侵袭转移能力变化. 结果： 转染了野生型抑癌基因KLF6的前列腺癌LNCaP细胞生长抑制率为(31.9±4.7)%，对照组为0%,差异有统计学意义（0.01），细胞周期比例表现为G2/M期减少，G0/G1期比例增加为(75.0±8.8)%，对照组为(55.9±7.1)%, 差异有统计学意义（0.05），细胞凋亡峰为(29.3±3.7)% ，对照组为(8.6±0.9)%, 差异有统计学意义（0.01）；每毫米划痕区内迁移入的细胞数为102.8±15.4，对照组为（192.7±25.2）, 差异有统计学意义（0.05）. 结论： 野生型抑癌基因KLF6的转染可以明显抑制前列腺癌LNCaP细胞的生长增殖, 并诱导其调亡,使其侵袭转移能力下降,其机制可能与野生型抑癌基因KLF6部分地逆转LNCaP细胞的恶性表型有关. 【关键词】 基因，肿瘤抑制；前列腺肿瘤；LNCaP；KLF6 　　【Abstract】 AIM: To observe the effect of wild type KLF6(wtKLF6) on proliferation,cell cycle,invasion and migration of prostate cancer cell line LNCaP by transgenic method. METHODS: WtKLF6 cDNA was obtained by RTPCR method from liver cell and inserted into plasmid pEGFPC1 for transfecting into LNCaP cells. The untransfected LNCaP cells served as the controls. MTT was used for observing the cell growth suppression, flow cytometer for apoptosis and cycle phase, invasion capability experiment for cell invasion capability with antioncogene wtKLF6 on prostate cancer cell line LNCaP by transgenic method for 48 h. RESULTS: After wtKLF6 was transfected into LNCaP cells, the growth suppression of LNCaP cells was enhanced ［(31.9±4.7)% vs 0%, 0.01］, the apoptosis was increased ［(29.3±3.7)% vs (8.6±0.9)%, 0.01］, the invasion capability was decreased［immigrated cell population/mm2, (102.8±15.4) vs（192.7±25.2）, 0.05］. Wtthe apoptosis, decrease the invasive capability of LNCaP cells, probably by reversing partially its malignant phenotype. 【Keywords】 genes, tumor suppressor prostatic, neoplasms LNCaP KLF6 　　0引言 　　新近发现抑癌基因KLF6 (Kruppel与前列腺癌的发病有密切关系,很可能前列腺癌的关键的“看门人（gatekeeper）”抑癌基因. 本实验即旨在研究将野生型抑癌基因KLF6转染入前列腺癌细胞系LNCaP后,观察其对LNCaP细胞生长增殖、细胞周期及侵袭转移能力的影响,并探求其可能的作用机制,以期为使用抑癌基因KLF6治疗激雄素依赖型前列腺癌提供实验和理论证据. 　　1材料和方法 　　1.1材料 　　目的基