针刺“三阴穴”对慢性非细菌性前列腺炎大鼠局部免疫功能的影响_医学论文.docVIP

针刺“三阴穴”对慢性非细菌性前列腺炎大鼠局部免疫功能的影响_医学论文 针刺“三阴穴”对慢性非细菌性前列腺炎大鼠局部免疫功能的影响_医学论文 【摘要】 目的 探讨针刺“三阴穴”改善慢性非细菌性前列腺炎炎症反应的局部免疫机制。方法 将48只雄性大鼠随机分成空白组、模型组、药物组和针刺组，每组12只,采用免疫佐剂法造模后,针刺组、药物组分别给予针刺“三阴穴”及舍尼通灌胃治疗15 d,观察各组大鼠的前列腺重量、系数、病理改变及组织匀浆中IgG、IL[8、iNOS含量的变化。结果 与模型组相比,针刺组的前列腺重量和系数明显降低(0.05或0.01)，慢性炎症的病理表现明显好转,针刺组IgG、IL[8、iNOS含量较模型组都有所降低，尤以IL[8显著(0.05)。结论 针刺“三阴穴”可以改善局部血液循环、调节局部免疫功能、促进炎症恢复。 【关键词】 慢性非细菌性前列腺炎 针刺 三阴穴 IgG IL[8 iNOS 慢性非细菌性前列腺炎是中青年男性的常见病，占临床泌尿外科前列腺炎患者的90 %～95 %。主要表现为会阴睾丸部胀痛、腰骶部酸痛、排尿异常、头晕乏力、尿道滴白、性功能障碍等。“三阴穴”是笔者在多年临床经验的基础上，通过大量的临床筛选所确立的治疗慢性前列腺炎的特效腧穴。至今已治疗患者300余例，总有效率达85 %。为了进一步探讨“三阴穴”治疗慢性非细菌性前列腺炎（CAP）的作用机制，并对实验动物模型标准进一步摸索，我们进行本项动物实验。 1 材料与方法 1.1 主要试剂及仪器 主要试剂:IL[8放免试剂盒(北京科美东雅生物技术有限公司提供，批号；IgG放免试剂盒(中国原子能科学研究所提供，批号；iNOS测试盒（南京建成生物工程研究所提供，批；福氏完全佐剂（美国Sigma公司提供，试剂号FB5189）；白百破减毒活疫苗(甘肃省疾病预防控制中心提供，批；舍尼通普适泰片（南京美瑞制药有限公司生产，市售，批。 主要仪器：低温高速离心机（德国 Heraeus Biofuge 28s）；低温冰箱 (院实验中心提供)；分析天平（瑞士 B6-1 METTLER）；光学显微镜（日本 Olympus CHK-213型）。 1.2 实验动物及分组 SPF级雄性SD大鼠48只，3月龄，质量（240±20）g；另取20只质量为240～300 g SD大鼠，用于取前列腺组织匀浆制作前列腺蛋白。均由甘肃中医学院动物实验中心提供，实验动物质量合格证号：SCXK（甘）2004-0006。动物购置后适应性喂养1周，全部实验操作均于SPF级动物实验室进行，设施使用合格证为SYXK(甘)2004-0006。 将以上48只大鼠依质量编号，按随机数字表法分为空白组、模型组、药物组、针刺组，每组12只。 1.3 造模方法[1] 除空白组外，其余3组大鼠复制慢性非细菌性前列腺炎动物模型。 （1）大鼠前列腺蛋白提纯液的制作： 取240～300 g雄性SD大鼠20只，断颈处死，在无菌条件下剥取前列腺组织，用冷生理盐水洗净，加入含0.5 % Triton100的生理盐水溶液，在冰水浴上用玻璃匀浆器制成匀浆，用低温高速离心机（-40 ℃）10000×g离心30 min，取上清液，采用双缩脲法进行蛋白含量测定，最后将上清液用0.1 mol/L、pH 7.2的PBS缓冲液稀释质量浓度为15 mg/mL。 （2）免疫注射：除空白组外，其余各组大鼠以乙醚麻醉，腹腔注射百白破疫苗0.5 mL，多点皮内注射大鼠前列腺蛋白提纯液和福氏完全佐剂的混悬液(比例为1∶1)1.0 mL，空白组分别行腹腔及皮内多点注射0.9 %生理盐水注射液0.5 mL、1.0 mL，以上各组均分别于第1 d、30 d注射2次。 1.4 处理 造模后第1 d开始, 药物组大鼠将舍尼通普适泰片研末，以蒸馏水溶解灌胃，给药剂量按动物体表面积比换算等效剂量为13 mg/kg，给药体积为10 mL/kg,每日1次，连续15 d；空白组和模型组同样抓取，但不给予任何治疗。 针刺组给予针刺“三阴穴”治疗。“三阴穴”包括：夹阴1（平耻骨联合上缘，在左侧腹股沟处）、夹阴2（平耻骨联合上缘，在右侧腹股沟处）、重阴（在会阴穴与阴囊根部之间取穴）[2]。将大鼠以仰卧位捆绑于鼠板上，以棉签蘸碘伏擦拭“三阴穴”，消毒局部皮肤，以32号1寸毫针针刺夹阴1、夹阴2两穴，进针1 cm；以32号1寸毫针针刺重阴穴，进针1.5 cm。进针后施平补平泻手法，留针20 min。每日1次，共15次。 1.5 观察指标 前列腺质量、前列腺系数：治疗15 d后，将各组大鼠断颈处死，取前列腺组织以分析天平称取前列腺质量，并计算前列腺系数（前列