针药结合治疗糖尿病性周围神经病变大鼠的实验研究_药学论文.docVIP

针药结合治疗糖尿病性周围神经病变大鼠的实验研究_药学论文 针药结合治疗糖尿病性周围神经病变大鼠的实验研究_药学论文 作者：郑敏， 张秋娟， 东红升， 施茵， 杨强 【摘要】 　　目的研究针药结合治疗对实验性糖尿病性周围神经病变(DPN) 的防治作用。方法采用随机分组设计，将大鼠分为模型组、电针组、穴位注射组、针药结合组，运用链脲佐菌素造成实验性DPN大鼠模型，用神经电生理方法观察坐骨神经传导速度，用电镜观察神经纤维的超微结构。结果针药结合治疗组与模型组、电针组、穴位注射组相比，感觉传导速度(SNCV)、运动传导速度（MNCV）均有所改善(0.05)，但未达到正常组的水平；针药结合治疗组大鼠坐骨神经轴突变性、脱髓鞘程度有所减轻。结论针药结合治疗法对实验性糖尿病周围神经病变具有一定的防治效果。 【关键词】 糖尿病周围神经病变 坐骨神经传导速度 针药结合 糖尿病周围神经病变（diabetic peryneuropathy, DPN）是糖尿病常见的慢性并发症和主要的致残因素之一。目前尚无特效治疗方法治疗糖尿病周围神经病，以往在临床中用针药结合治疗DPN取得了较好的临床疗效［1］。本实验通过观察针药结合治疗对糖尿病大鼠坐骨神经结构和神经传导速度的影响，验证针药结合治疗对糖尿病周围神经病变的防治作用。 　　1 材料与仪器 　　1.1 动物选用4月龄健康雄性清洁级Wistar大鼠90只，体重200～220 g，购自中国科学院上海动物实验中心（许可证号码：SCXK(沪)2003－0003）。常温常湿环境中饲养。 　　1.2 药物与试剂链脲佐菌素（STZ）购自美国Sigma产品，批号S-0130；柠檬酸、柠檬酸三钠、水合氯醛、甲醛、多聚甲醛购自上海试剂一厂；雪莲注射液：新疆中药厂第二分厂生产。 　　1.3 仪器电子天平，上海天平仪器厂出品；强生稳豪型血糖仪，上海强生公司出品；神经电生理检测仪，Medtronic, Keypoint, Denmark；DK-8D型电热恒温水槽，上海医用恒温设备厂出品；石蜡切片机，德国Lico公司 RM2145 KON；透射电镜，日立H-600。 　　2 方法 完全随机分组设计，对照实验。 　　2.1 动物模型制备及分组造模前大鼠禁食过夜，次日用STZ（STZ溶于0.1 mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，冰浴中新鲜配制）按55 mg/kg 剂量腹腔内一次注射（参照施新猷《医学动物实验方法》）诱导糖尿病。1周后，用血糖仪测定尾尖血血糖，测血糖前禁食过夜，血糖 ≥15 mmol/L判定为糖尿病鼠。实验前监测血糖，血糖＜15 mmol/L的大鼠予以剔除。正常对照大鼠仅腹腔注射等体积的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。常规喂养4周，随机选取10只DM大鼠，进行血糖、体重、温度阈值和神经传导速度检测，与造模前大鼠比较以空腹血糖≥15 mmol/L、坐骨神经SNCV、MNCV明显减慢、摆尾温度阈值升高及坐骨神经有髓纤维形态学改变，为实验性DPN大鼠模型。 造模成功后，按随机数字表法随机分为模型组、电针组、穴位注射组、针药结合组，每组15只。正常组与模型组不作任何治疗，电针组、穴位注射组和针药结合治疗组给予相应治疗，剩余大鼠备用。 　　2.1.1 电针组（15只）取穴：肾俞（双）、足三里（双）。穴位定位参照《实验针灸学》［2］。接G6805-Ⅱ型电针治疗仪，连续波，频率2 Hz，电流强度以刺激部位皮肌微颤为度，20 min/次，1次/2 d，共治疗12次。 　　2.1.2 穴位注射组（15只）用雪莲注射液于上述穴位注射，每次轮换取1穴，每穴0.1 ml，治疗次数同上。 　　2.1.3 针药结合组（15只）具体方法和治疗次数先同电针组，起针后治疗再同穴位注射组。 　　2.1.4 模型对照组（15只）不作任何治疗，只作与治疗组相同的固定。 　　2.1.5 正常对照组（15只）选正常Wistar大鼠，作与治疗组相同的固定。 　　2.2 指标检测 　　2.2.1 一般项目观察各组大鼠造模前及造模后4周、8周的血糖、体重变化。 　　2.2.2 摆尾温度阈值造模前及造模后4周、8周将鼠尾浸入水中约2 cm，当水温增高而尾摆动并露出水面时记录水温，此时水温为摆尾温度阈值(Tailflick Threshold Temperature，TTT)。 　　2.2.3 电生理测定造模前及造模后4，8周，用10％水合氯醛将大鼠麻醉，在麻醉状态下用神经电生理检测仪检测大鼠右侧坐骨神经传导速度。 运动神经传导速度检测（MNCV）：第1刺激部位在坐骨窝，第2刺激部位在踝部内侧，均用两个针电极经皮插入，电极间距为2 mm，接地于尾部，保持皮温30℃，用方形波（10～20mA，40μs脉波宽）刺激神经,用两个针电极在同侧的足部第2趾骨间肌记录复合肌肉动作电位，记