國科會個人計畫 - 微生物學系 - 東吳大學.docVIP

腸炎弧菌活而不長菌體的研究.I.形成、特性與在食品衛生之意義 Study on the Viable but Non-culturable State of Vibrio parahaemolyticus. I . Formation, Characterization and Significance in Food Sanitation 東吳大學 微生物系 黃顯宗 教授 台北市 士林 東吳大學 微生物系 中 文 摘 要 關鍵字：腸炎弧菌、活而不長、特性、環境、食品 腸炎弧菌是國內最重要的食品中毒細菌，歷年統計顯示該菌所造成的中毒案件數目最多，而時有流行之趨勢，前年源自印度的O3:K6型腸炎弧菌即曾在全台灣造成流行。腸炎弧菌常常發現在河口港灣的環境中，無論源自國外或本土之致病性腸炎弧菌，都可能有相當的能力長期存活在本土的環境中，伺機而發。這些都說明腸炎弧菌在環境的存活尚有很多未明之處，影響到他們在食品衛生上的重要性。在環境中這些菌株可能形成活而不長（viable but non-culturable）的狀態，藉以長期存在，在食品衛生的偵測時也容易討漏被偵測到。文獻中有不少有關於這種狀態的形成與恢復（resuscitation）的報告，主要是站在生態的角度進行研究。活而不長狀態研究中有關弧菌者，以創傷弧菌研究較多，而腸炎弧菌的相關研究不多，我們的初步嘗試發現腸炎弧菌較困難進入活而不長的狀態。同時，活而不長菌體的研究也很少以食品衛生的角度來探討。因此，繼續過去有關腸炎弧菌的研究，本系列計畫的研究目標為︰（1）瞭解影響腸炎弧菌活而不長狀態形成與恢復中的各種因素，例如養分、溫度、鹽度、幾丁質與其他保護物質等；（2）瞭解腸炎弧菌活而不長狀態下的環境耐受特性；（3）瞭解腸炎弧菌活而不長狀態菌體在食品中的存活特性與偵測；（4）探討腸炎弧菌活而不長狀態的各種生理變化與其對致病因素表現的影響。本系列計畫以應用為主開始，進而適度研究活而不長現象的基本面。在第一年度工作，重點將以活而不長菌體的形成與恢復的特性與在食品中存活檢驗為主，先瞭解其在食品衛生的意義﹔第二年度中主要是瞭解此活而不長狀態的生理與生化種種變化﹔第三年度中主要在完成第二年未能完成的部分與耐熱溶血素與其他致病因子的穩定性與表現。完成後可望可建構合理的分子生物模式，進而繼續進行確認。 English Summary Keywords: Vibrio parahaemolyticus, viable but non-culturable, characterization, environment, food Vibrio parahaemolyticus is one of the most important foodborne pathogens in Taiwan. Pathogenic strain will be originated directly or indirectly from contaminated seafood. In 1997, most of the V. parahaemolyticus outbreak in Taiwan were due to the K6 strains originated from India. Such K6 strains were only isolated from a few cases last year. The imported or domestric strains of V. parahaemolyticus are capable of survival in local aquatic environment and later contaminated human food items. Bacteria can survive well in environment in a viable but non-culturable state (VNC). VNC state has been studied in many pathogenic bacteria. In Vibrio species, most of the studies concentrated on V. vulnificus, and only two papers on V. parahaemolyticus were published by Chai et al. The aims of this investigation are: (1) the formation and resuscitation of VNC state in V. parahaemolyticus,