麦冬皂苷研究Ⅲ·麦冬须根中麦冬总皂苷与麦冬皂苷D、D＇的含量测定方法研究.pdfVIP

麦冬皂苷研究 麦冬须根中麦冬总皂苷和麦冬皂苷D D 的含量测定方法研究 徐德生 吴笑如 冯怡 顾方 上海中医药大学 200032 摘要 目的 建立麦冬皂苷的质量标准 对麦冬皂苷进行质量控制 方法 采用紫外分光光度法对麦冬 总皂苷进行含量测定 采用 HPLC-ELSD方法对麦冬中的皂苷进行含量测定 结果 建立了紫外分光光 度法测定麦冬总皂苷和HPLC-ELSD方法测定麦冬皂苷DD 结论 紫外含测方法和HPLC-ELSD含测方 法线性关系良好 重现性佳 为麦冬皂苷质量标准的建立奠定了基础 关键词 川麦冬须根 皂苷 大孔树脂 蒸发光散射检测器 麦冬为百合科沿阶草属植物 Ophiopogon japonicus (L.f.) ker-Gawl的干燥块根 是一味常 用滋阴中药 始载于 神农本草经 它具有养阴生津 润肺清心的功能 可用于热病伤津 心烦口 [1] 渴等症 现代研究发现 麦冬含有甾体皂苷 高异黄酮 多糖 氨基酸等成分 其中麦冬皂苷类成 分具有一定的抗心肌缺血 抗心律失常作用 临床用于冠心病心绞痛取得了一定疗效 目前 医药和 [2] 传统保健食品均把麦冬块根作为原料药 将须根弃而不用 但根据文献 报道以及我们的实验研究发 现 川麦冬须根富含皂苷 且其含量高于浙麦冬 川麦冬块根 与块根相比药效无显著差异 就工业 化生产而言 可变废为宝 大大降低生产成本 提高社会及经济效益 我们从麦冬须根中经提取分离 得到了纯度达70%以上的麦冬总皂苷,为进一步充分利用麦冬须根,本文对麦冬须根及麦冬总皂苷进行 了质量标准研究 1 仪器与试药 HP8453可见紫外分光光度仪 安捷伦科技公司 美国 RE-52AA旋转蒸发仪 上海生化仪器厂 TG-332A型微量天平 上海精密科学仪器有限公司 Agilent1100高效液相色谱仪 安捷伦科技公司 美国 PL-ELSD蒸发光散射检测器 PL公司,英国 麦冬皂苷D 麦冬皂苷D 标准品 自制 乙腈 甲醇为色谱纯 其他试剂均为分析纯 川麦冬须根 购自上海徐重道中药饮片厂 上海中医药大学生药教研室鉴定为 japonicus 2 实验方法与结果 2.1总皂苷含量测定(紫外分光光度法) 2.1.1麦冬皂苷D对照品溶液的配制 精密称取麦冬皂苷D标准品12.90mg置10ml容量瓶中 用甲 醇定容 摇匀即得 号液 2.1.2药材样品液的制备 取川麦冬须根药材 20g用 80%乙醇提取 提取液回收乙醇 用乙醚萃取 二次 再以水饱和正丁醇萃取四次 正丁醇萃取液合并 用0.1mol/l的NaOH溶液反萃二次 正丁醇 液回收至干 用50%甲醇溶解并定容至5ml摇匀即得 2.1.3大孔树脂富集物样品液的制备 取川麦冬须根药材一定量 80%乙醇10倍量回流提取3次 每 次 1小时 提取液回收乙醇后 以2000r/min离心 10分钟 离心后的药液定容到0.7g生药/ml作 为上柱供试液 取上柱供试液25ml,吸附时间 2hr,先用0.1mol/L的NaOH溶液 200ml冲洗 再用蒸 馏水洗至流出液呈中性 最后用250ml 70%的乙醇洗脱 收集洗脱液 回收乙醇 干燥 取大孔树脂 富集物0.5g用50%甲醇溶解并定容至5ml摇匀即得 [3] 2.1.4标准曲线的制备 精密吸取麦冬皂苷D 号标准品溶液0.10.20.30.40.50.6ml 于具塞试管中 沸水浴上挥干 加HClO10ml于65水浴加热15min后 立即置冰水浴中终止反应 4 在UV395nm处测定吸收值 以麦冬皂苷O.D的量 mg为纵坐标 吸光度值为横坐标 其回归方程为 Y=0.80645A+0.00173r=0.9993线性范围为0.1290mg0.7740mg 2.1.5稳定性试验 取麦冬总皂苷提取物 每间隔一定时间测定吸收值 结果样品显色后2小时内 吸收值基本稳定 RSD=0.47% 2.1.6精密度试验 取同一样品连续测定五次 计算吸光度值的RSD=0.17% 2.1.7重现性试验 取按相同制备方法制备的同一批次的五份样品 测定吸光度值 RSD=3.3% 2.1.8加样回收率试